GDNF通過AKT-β-catenin促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的研究.pdf

1、目的：目前，膠質(zhì)瘤發(fā)生的病因及其發(fā)生機(jī)制尚未明確定論，但膠質(zhì)瘤細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路上某些信號(hào)傳導(dǎo)因子的表達(dá)情況的變化，被認(rèn)為是引發(fā)膠質(zhì)瘤一系列生物學(xué)效應(yīng)的機(jī)制之一。故近年有關(guān)膠質(zhì)瘤細(xì)胞內(nèi)一系列信號(hào)傳導(dǎo)的機(jī)制成為神經(jīng)外科學(xué)研究中令人關(guān)注的熱點(diǎn)。在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中，AKT與β-catenin通路之間存在著各種交叉聯(lián)系，二者都具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的生物學(xué)效應(yīng)。最近研究證實(shí)了GDNF及其下游通路PI3K/AKT信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞生長具有調(diào)節(jié)作用且在膠質(zhì)瘤組織

2、中GDNF高表達(dá)，因此我們研究在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中GDNF對(duì)AKT和β-catenin的表達(dá)是否產(chǎn)生影響及其意義。
　　方法：我們前期的免疫組織化學(xué)研究顯示:在相同視野及處理?xiàng)l件下，WHO膠質(zhì)瘤分級(jí)Ⅰ和Ⅱ，Ⅱ和Ⅲ，Ⅲ和Ⅳ級(jí)的樣本之間細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞核的形態(tài)較為類似，因此我們將臨床膠質(zhì)瘤患者的術(shù)中所取膠質(zhì)瘤樣本分為兩個(gè)組別，即低級(jí)別膠質(zhì)瘤(WHO分級(jí)Ⅰ、Ⅱ級(jí))和高級(jí)別膠質(zhì)瘤(WHO分級(jí)Ⅲ、Ⅳ級(jí))，每組各12例;另取腦挫裂傷患者正常腦組織12

3、例，設(shè)為非腫瘤組織組。我們分別提取這三組組織中的總蛋白，并用蛋白免疫印跡法(western blot)測(cè)定這三組蛋白中AKT和β-catenin及二者磷酸化的表達(dá)水平。將膠質(zhì)瘤細(xì)胞系C6細(xì)胞分為三組:空白對(duì)照組、BSA組和GDNF組。用GDNF藥物處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞系C6細(xì)胞，提取細(xì)胞總蛋白，WB檢測(cè)每組細(xì)胞中AKT、p-AKT、β-catenin和p-β-catenin的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.與非腫瘤組織相比，在膠質(zhì)瘤組織中AKT、

4、p-AKT和β-catenin、p-β-catenin表達(dá)增高(P＜0.01)，且在高級(jí)別膠質(zhì)瘤組的表達(dá)高于低級(jí)別膠質(zhì)瘤組(P＜0.01)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，空白對(duì)照組、BSA處理組和GDNF處理組中AKT的表達(dá)無明顯變化(P＞0.05），GDNF處理組中p-AKT的表達(dá)高于空白對(duì)照組和BSA處理組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01）。3.在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中，GDNF處理組中β-catenin和p-β-catenin的表