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文檔簡介
1、第一部分運用套管法建立胸主動脈腹腔移植模型
目的:尋找一種可模擬心臟移植物血管病發(fā)病機制,同時簡單易學、可復制性強、存活率高的動物模型。
方法:利用自制套管,將供體胸主動脈套入套管并將其移植至受體的腹主動脈中。將30只受體SD系大鼠隨機分成2組,分別接受供體Wistar系和SD系大鼠的胸主動脈移植,構(gòu)建同基因移植組(SD To SD)(A組)和異基因移植組(Wistar To SD)(B組)大鼠各15只。術(shù)前、術(shù)后均
2、禁食12小時,可自由飲水。以麻醉清醒后四肢能自由活動,可自由飲水為手術(shù)成功標志。于7、28及56天3個時間點,取各移植動脈標本(n=5)行病理檢查觀察其病理變化,并用計算機圖像系統(tǒng)分析血管內(nèi)膜增厚程度。
結(jié)果:B組動脈內(nèi)膜從28天起增厚,56天時增厚明顯,與A組及正常對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05),而 A組與正常對照組相比各時間點均無顯著差異(p>0.05)。B組56天時的病理變化主要是單核巨噬細胞及細胞外基質(zhì)在內(nèi)
3、膜積聚,中膜平滑肌細胞增殖并向內(nèi)膜遷移,致內(nèi)膜呈彌漫―同心圓‖樣增厚。B組動脈內(nèi)膜改變與心臟移植物血管病相類似。
結(jié)論:運用套管法建立胸主動脈腹腔移植模型來模擬心臟移植物血管病是簡便、可行的。該模型可用于心臟移植物血管病發(fā)病機制及其防治措施的研究。
第二部分雷公藤內(nèi)酯醇經(jīng)NF-κB信號通路防治心臟移植物血管病的研究
目的:觀察雷公藤內(nèi)酯醇對于心臟移植物血管病發(fā)展的影響,并探究雷公藤內(nèi)酯醇阻斷NF-κB及其下
4、游分子表達的機制。
方法:30只SD大鼠做受體,30只Wistar大鼠做供體,利用第一部分的方法建立異基因胸主動脈腹腔移植模型后,隨機分成2組,分別為C組(雷公藤內(nèi)酯醇干預組):Wistar大鼠胸主動脈移植至SD大鼠腹主動脈,術(shù)后第1天起,雷公藤內(nèi)酯醇(200μg/kg/天)灌胃;D組(雷帕霉素干預組):Wistar大鼠胸主動脈移植至SD大鼠腹主動脈,術(shù)后第1天起,雷帕霉素(1.25mg/kg/天)灌胃;每組各15只;于術(shù)后第
5、7、28、56天3個時間點(n=5),留取移植血管后處死大鼠。移植血管行病理染色觀察血管病理情況,行免疫組織化學染色觀察NF-κB、NOS2、VCAM-1及ICAM-1的表達情況,第一部分標本為對照組。
結(jié)果:
1.在28、56天兩個時間點,雷公藤內(nèi)酯醇干預組(C組)及雷帕霉素干預組(D組)血管內(nèi)膜厚度與同基因移植組(A組)及異基因移植組(B組)比較均有顯著差異(p<0.05),C、D組內(nèi)膜厚度比較無顯著差異(p>0
6、.05);C、D組病理學改變與B組相似,但內(nèi)膜增生、炎性細胞浸潤、平滑肌細胞增殖及遷移明顯減少,但較A組明顯。
2. A、B組血管內(nèi)皮細胞中均表達NF-κB p65及NOS2,B組較A組表達明顯增強,積分光密度值相比有顯著差異(p<0.05);C組NF-κB p65、VCAM-1、ICAM-1及NOS2在內(nèi)皮細胞中表達明顯減弱,積分光密度值與A組及B組比較均有顯著差異(p<0.05)。
結(jié)論:
1. NF-
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