黑大豆皮中色素的提取純化、結(jié)構(gòu)鑒定及其性質(zhì)的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、黑大豆在我國(guó)北方山區(qū)分布廣泛,具有絕對(duì)的資源優(yōu)勢(shì),而且栽培面積還在不斷的擴(kuò)大。黑大豆皮在化妝、保健食品加工方面有著廣泛的用途。有研究表明:黑大豆皮中的花色苷具有抗氧化和清除自由基功能。本試驗(yàn)以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大豆研究中心提供的黑大豆為原料,探索黑大豆皮中的花色苷的提取、分離工藝,并對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析研究,為黑大豆皮進(jìn)一步廣泛開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù),以促進(jìn)黑大豆皮的利用價(jià)值。 ⑴在溶劑法中,對(duì)pH值,料液比進(jìn)行單因素試驗(yàn),通過控制提取溫度

2、、提取時(shí)間、溶劑濃度,以吸光值為指標(biāo),采用三因素三水平正交試驗(yàn)確定最佳的提取條件,確定了試驗(yàn)最優(yōu)提取條件為:最佳pH值為4-6,料液比為1:40,溶劑濃度為60%,提取時(shí)間為1小時(shí),提取溫度為60℃,得到的提取液稀釋到200ml,其吸光值為0.865。 ⑵在超聲波法中,通過控制超聲功率,超聲時(shí)間、溶劑濃度,料液比,以吸光值為指標(biāo),采用四因素三水平正交試驗(yàn)確定最佳的提取條件,確定了試驗(yàn)最優(yōu)提取條件為:溶劑濃度40%,超聲功率600

3、w,料液比1:30,超聲時(shí)間40min。得到的提取液稀釋到200ml,其吸光值為0.795,可知,溶劑法提取的效果比超聲波法要好。 ⑶在提取物分離工藝中,引入了大孔吸附樹脂、SephadexLH-20凝膠柱色譜技術(shù)。通過對(duì)樹脂種類的篩選、影響吸附和解吸因素的研究,建立了大孔樹脂純化黑大豆皮提取物的工藝:選用AB-8大孔吸附樹脂為吸附劑,分離黑大豆皮中的花色苷較適宜的吸附條件為:流速2mL/min、濃度0.074mg/mL、pH為

4、6左右;較適宜的解吸條件為:洗脫劑為60%乙醇溶液,流速為2mL/min。以此工藝?yán)L制的洗脫曲線結(jié)果表明,采用此純化工藝取得較理想效果,洗脫峰集中,對(duì)稱性好,無明顯拖尾現(xiàn)象,其吸附率為80%,解析率為80%。聚酰胺純化黑大豆皮色素,濃度為0.086mg/mL,500%乙醇水溶液,流速為2mL/min,pH為6左右,洗脫效果較好。其吸附率為60%,解析率為700%。 ⑷采用大孔樹脂法對(duì)黑大豆皮中的花色苷進(jìn)行純化。用Sephadex

5、LH-20凝膠柱色譜對(duì)花色苷進(jìn)行分離,用60%甲醇溶液進(jìn)行洗脫,洗脫流速為1mL/min,通過TLC、HPLC檢測(cè),合并相同組分,得到化合物;TLC和HPLC檢測(cè),檢驗(yàn)了該物質(zhì)的純度;運(yùn)用紫外、核磁共振波譜學(xué),結(jié)合化學(xué)定性鑒別的方法,對(duì)化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定,確定該物質(zhì)為3-半乳糖-矢車菊色素。對(duì)得到的花色苷進(jìn)行酸法和酶法水解進(jìn)行比較,在酸法水解中水解溫度為90℃,水解時(shí)間30min,料液比1:30,鹽酸乙醇溶液濃度1.5mol/L,水解

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