米諾環(huán)素及蛇床子素對(duì)C57BL-6小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的作用及機(jī)制研究.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文米諾環(huán)素及蛇床子素對(duì)C57BL/6小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的作用及機(jī)制研究姓名：陳曉紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：胡學(xué)強(qiáng)20090525米諾環(huán)素及蛇床子素對(duì)C 5 7 B L ／6 小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的作用及機(jī)制研究諾環(huán)素對(duì)M S 的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎( e x p e r i m e n t a la u t o i m m u n ee n c e p h a l o m

2、 y e l i t i s ，E A E ) 有治療作用，特別是在聯(lián)用I F N ．f I 、G A 和阿托伐他汀( a t o r v a s t a t i n ) 之后。G C S 具有強(qiáng)有力的抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用，是M S 急性復(fù)發(fā)期的常規(guī)治療手段，但一些患者的治療效果常因其伴隨的副作用所限制，已有研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)用G C S 與其它藥物如促紅細(xì)胞生成素( e r y t h r o p o i e t i n ，E P O ) 和

3、I G I V 可以提高治療效能及減少G C S 用量。本研究的目的豐要通過聯(lián)用亞有效劑量的米諾環(huán)素和強(qiáng)的松( 一種常用的合成的口服G C S ) 對(duì)E A E 的作用及探討其相關(guān)機(jī)制，為M S 的治療探索一種新的治療手段。方法使用髓鞘少突膠質(zhì)糖：蛋( m y e l i no l i g o d e n d r o c y t eg l y c o p r o t e i n 3 5 _ 5 5a m i n oa c i dp e

4、p t i d e ，M O G 3 5 —5 5 ) 免疫C 5 7B L ／6 小鼠，復(fù)制E A E 模型。在E A E小鼠發(fā)病后使用P B S 、單用亞有效劑量米諾環(huán)素、單用亞有效劑量強(qiáng)的松及聯(lián)用亞有效劑量米諾環(huán)素和強(qiáng)的松對(duì)E A E 小鼠進(jìn)行治療，每日進(jìn)行臨床評(píng)分，觀察E A E 小鼠病情變化；在發(fā)病的急性期、復(fù)發(fā)期和慢性期對(duì)E A E 小鼠行頭顱核磁共振( m a g n e t i c r e s o n a n c e i

5、 m a g i n g ，M R I ) 檢查，觀察其影像學(xué)改變；同時(shí)在上述不同的疾病時(shí)期進(jìn)行腦和脊髓的炎癥、脫髓鞘檢查評(píng)價(jià)其病理學(xué)的改變。使用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)( r e v e r s et r a n s c r i p t i o n a l —p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n ，R T ．P C R ) 方法測定不同處理組小鼠皮質(zhì)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子( b r a i n

6、—d e r i v e d n e u r o t r o p h i cf a c t o r , B D N F ) 和神經(jīng)生長因子( n e r v e g r o w t hf a c t o r ，N G F ) m R N A 的表達(dá)情況。結(jié)果成功復(fù)制E A E 模型，病情觀察發(fā)現(xiàn)，與P B S 治療組比較，單用亞有效劑量的米諾環(huán)素或強(qiáng)的松不能減輕E A E 癥狀，聯(lián)合使用亞有效劑量的米諾環(huán)素和強(qiáng)的松可以有效減輕E A E

7、 病情，并抑制E A E 的復(fù)發(fā)。影像學(xué)上發(fā)現(xiàn)，聯(lián)用亞有效劑量的米諾環(huán)素和強(qiáng)的松較P B S 組可以明顯較少E A E 急性期腦內(nèi)病灶，在E A E 復(fù)發(fā)及慢性期可以減輕血腦屏障( b l o o d - b r a i nb a r r i e r , B B B ) 炎癥。在病理學(xué)上發(fā)現(xiàn)，聯(lián)用亞有效劑量的米諾環(huán)素和強(qiáng)的松較P B S 治療組可以明顯減少脊髓及腦部炎癥細(xì)胞浸潤和脫髓鞘。R T ．P C R 提示P B S 治療組的E