IGF-1調(diào)控下染料木黃酮對睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細胞增生的抑制作用研究.pdf

1、[目的] 通過研究染料木黃酮（genistein，Gen）和胰島素樣生長因子（insulin-like growth factor-1，IGF-1）對睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細胞的作用，觀察在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，Gen對睪酮誘導(dǎo)的細胞增生的抑制作用及對細胞周期的影響，同時通過對細胞周期蛋白和細胞周期蛋白激酶的測定，初步探討IGF-1調(diào)控下Gen對睪酮誘導(dǎo)的細胞增生抑制的分子作用機制。 [方法] 本實驗采

2、用睪酮溶液刺激人前列腺正常上皮細胞（RWPE-1Cells）；MTT法測定IGF-1和Gen對睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細胞增生的影響，觀察在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下，Gen對睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細胞增生的抑制作用；采用流式細胞儀檢測IGF-1和Gen對睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細胞周期的影響，采用Western-Blot實驗檢測IGF-1和Gen對異常增生的RWPE-1細胞周期蛋白CyclinB1、CyclinD1和細胞周期蛋白激酶C

3、DK4的影響。 [結(jié)果] （1）MTT法比色結(jié)果，Gen能夠抑制睪酮誘導(dǎo)的RWPE-1細胞增生，且隨著濃度的增加，抑制作用加強，40.00μmol/L的Gen作用3天是較為適宜的作用濃度和作用時間；IGF-1能夠促進RWPE-1細胞的增生，且隨著濃度的增加，促進作用加強，而6.4nmol/L的IGF-1作用3天是較為適宜的作用濃度和作用時間；而在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下，Gen的抑制率高于單獨使用Gen的抑制率。

4、 （2）流式細胞儀結(jié)果，在適宜濃度的IGF-1水平調(diào)控下Gen對睪酮誘導(dǎo)增生的RWPE-1細胞的作用，使G1期細胞百分比較對照組減少，S期細胞百分比較對照組增加，G2/M期細胞百分比較對照組和單獨的Gen組均增加。 （3）Western-Blot實驗結(jié)果，Gen上調(diào)CyclinB1的表達，下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達；IGF-1上調(diào)CyclinB1、CyclinD1和CDK4的表達；在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，G

5、en上調(diào)CyclinB1的表達，下調(diào)CyclinD1、CDK4的表達。 [結(jié)論] （1）Gen能夠抑制睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細胞的增生，且呈濃度依賴趨勢。在適宜濃度的IGF-1調(diào)控下，Gen對睪酮誘導(dǎo)RWPE-1細胞的抑制作用比單獨使用Gen效果更明顯。 （2）Gen對睪酮誘導(dǎo)的RWPE-1細胞增生的抑制作用可能是由于其對細胞周期G2/M期的阻滯作用，且在IGF-1的調(diào)控下其阻滯作用更為明顯。 （3）Gen