CGRP對(duì)AngⅡ誘導(dǎo)HUVECs損傷的抑制作用及其ERK1-2-RAMP1信號(hào)通路.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:觀察降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對(duì)血管緊張素II(AngII)誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷的保護(hù)作用,并探索此作用與細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK1/2)及受體活性修飾蛋白1(RAMP1)的關(guān)系。
　　方法:體外培養(yǎng)HUVECs,用不同濃度的CGRP、AngII處理細(xì)胞,噻唑藍(lán)比色法(MTT)觀察HUVECs活力的濃度效應(yīng);流式細(xì)胞儀(FCM)觀察分析HUVECs凋亡率及增殖指數(shù)的改變;顯微鏡觀察 HUVECs形態(tài)學(xué)

2、變化;RT-PCR檢測(cè)RAMP1 mRNA水平;Western blot檢測(cè)p-ERK1/2及RAMP1的表達(dá)。
　　結(jié)果:CGRP(0.1-1000nmol/L)能濃度依賴性增加 HUVECs的活力,而 AngII(0.1-100nmol/L)能濃度依賴性降低HUVECs的活力;AngII處理后HUVECs增殖指數(shù)PI值明顯下降,CGRP及PD98059(ERK1/2抑制劑)預(yù)處理后再用AngII處理,PI值上升; AngII作

3、用于HUVECs在第10min時(shí)ERK1/2磷酸化水平達(dá)到最大;CGRP干預(yù)下能抑制 AngII刺激的HUVECs內(nèi) ERK1/2磷酸化水平;CGRP8-37(CGRP受體拮抗劑)能部分減弱 CGRP的抑制 ERK1/2磷酸化水平作用;PD98059(ERK1/2抑制劑)預(yù)孵育細(xì)胞,能顯著降低ERK1/2磷酸化水平,對(duì)細(xì)胞內(nèi)總ERK1/2水平無(wú)明顯影響;CGRP及AngII對(duì)總蛋白R(shí)AMP1的表達(dá)沒有影響,AngII對(duì)膜蛋白R(shí)AMP1的

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