基因芯片篩查STEMI患者PBMCs相關(guān)基因及TNFSF6、CYP1A1的表達.pdf

1、急性心肌梗塞(AMI)是冠心病的嚴重階段，經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)(PCI)是目前治療AMI的主要手段，然而再灌注早期冠狀動脈血流的快速恢復可引起心肌缺血/再灌注損傷(IRI)。氧化應激(oxidativestress，OS)反應是導致IRI發(fā)生的重要機制，是多基因表達異常引起的病理生理過程。以往的研究常局限于對單個基因或少數(shù)幾個功能相關(guān)基因的分析，很難從整體上把握心肌缺血再灌注損傷分子機制?；蛐酒瑸檠芯啃募RI導致的疾病提供了強有力的系

2、統(tǒng)研究手段。腫瘤壞死因子配體超家族成員6(1NFSF6)和細胞色素P4501A1(CYP1A1)參與細胞OS反應。外周血單個核細胞(PBMCs)在缺血等致病因素影響下異?；罨?，是參與機體應激反應的重要細胞。 目的： 1.了解ST段抬高型AMI(STEMI)患者PCI術(shù)前后心肌IRI損傷過程中細胞氧化應激及毒性相關(guān)基因的變化。 2.觀察心肌IRI過程中TNFSF6和CYP1A1基因含量表達的改變及臨床意義。

3、 材料與方法： 1.研究對象 STEMI組：STEMI患者11例，男7例，女4例，平均年齡61.44±13.70歲(33～75歲)，所有病例均參照2001年中華醫(yī)學會心血管病學分會AMI的診斷標準診斷，病例入選標準：診斷明確的急性ST段抬高心肌梗塞，其中梗塞部位：廣泛前壁2例、前壁或前間壁4例、下壁或后壁5例(其中伴右室梗塞者2例)、廣泛性心肌梗塞組(兩個部位及以上)4例。病例排除標準：AMI合并以下疾?。宏惻f性心肌梗塞

4、病史、心源性休克或泵衰竭、心臟瓣膜病、自身免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤、嚴重的肝腎功能不全。正常對照組為與患者年齡、性別相匹配的健康志愿者10人，男7人，女3人，平均年齡53.00±6.55歲(32~61)。所有患者均沒有接受抗腫瘤藥物、放射和免疫抑制劑治療，均非移植患者、人類免疫缺陷病毒感染(艾滋病)患者、粒細胞缺乏者。 STEMI組于急性發(fā)病入院確診后即刻抽取肘靜脈血10ml，立即注入含0.05ml肝素的無菌離心管，所有過程

5、均嚴格無菌操作。急性心梗常規(guī)等治療第3d、第7d再各抽一次肘靜脈血10ml；正常對照組：晨起空腹抽取肘靜脈血10ml，方法同上。 2.實驗方法 2，1PBMCs的分離采用淋巴細胞分離液密度梯度離心法。 2,2基因芯片篩查心肌IRI過程中相關(guān)基因的變化。 2,3Real-timePCR驗證TNFSF6、CYP1A1基因表達的含量。 3.統(tǒng)計學分析 數(shù)據(jù)以均數(shù)士標準差(-x±s)表示，各組間比

6、較用方差分析，相關(guān)分析采用簡單相關(guān)分析法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1.STEMI組中，顯示顯著變化的基因有14個，其中表達顯著上調(diào)的為8個，顯著下調(diào)的為4個。 上調(diào)的基因中，細胞生長停滯/衰老相關(guān)1個(GADD45A)，氧化和代謝應激相關(guān)1個(PRDX2)，熱休克相關(guān)3個(HSPD1，DNAJB1，DNAJB2)，DNA損害和修復相關(guān)1個(RAD50)，及凋亡信號相關(guān)2個(TNFSF6，TRA

7、DD)。 下調(diào)的基因中細胞增殖/癌變相關(guān)1個(CCNG1)，氧化和代謝應激相關(guān)2個(CAT，CYP1A1)，DNA損害和修復相關(guān)1個(ATM)。 2.STEMI組TNFSF6、CYP1A1基因的相對含量前者明顯高于正常對照組、后者明顯低于正常對照組。 結(jié)論： 1.AMI(STEMI型)行PCI術(shù)前后IRI受多種基因的調(diào)控，包括氧化代謝應激、熱休克、DNA損害和修復及凋亡信號相關(guān)基因，整體上了解到心肌缺血/