菠蘿蜜果實(shí)香味物質(zhì)形成相關(guān)酶活性及基因表達(dá)分析.pdf

1、菠蘿蜜是著名的熱帶果樹，香氣是其重要的果實(shí)品質(zhì)屬性。本研究以8份菠蘿蜜種質(zhì)（12As，12Bs，12Cs，12D，12E，13D，13K和14A）不同成熟階段的果實(shí)為材料，分析了果實(shí)香味物質(zhì)形成有關(guān)的4個(gè)主要酶酶活性變化，同時(shí)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分析了相應(yīng)11個(gè)基因的表達(dá)變化，以期為進(jìn)一步開展菠蘿蜜育種和栽培技術(shù)研究提供理論基礎(chǔ)。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　1、測定了脂氧合酶在菠蘿蜜果實(shí)不同成熟階段的活性變化，結(jié)果表明，除

2、12E和14A種質(zhì)中酶活性峰值出現(xiàn)在第Ⅲ階段外，其余6份種質(zhì)中脂氧合酶活性均隨著果實(shí)成熟不斷下降。分析了5個(gè)脂氧合酶基因家族成員(AhLOX1、AhLOX2、AhLOX3、AhLOX4和AhLOX5)在果實(shí)不同成熟階段的基因表達(dá)變化，脂氧合酶基因主要在未成熟的果實(shí)中表達(dá)，不同基因的表達(dá)水平存在差異。在12Cs、12D和13D種質(zhì)中，5個(gè)基因的表達(dá)變化與LOX酶活性變化趨勢完全一致;12As和13K種質(zhì)中，只有AhLOX1基因與酶活性變化

3、不一致，其余4個(gè)基因均在表達(dá)量降低的過程中伴隨著酶活性的下降;12Bs、12E和14A種質(zhì)中，基因表達(dá)變化與酶活性變化不完全一致。
　　2、測定了氫過氧化物裂解酶在菠蘿蜜果實(shí)不同成熟階段的活性變化，結(jié)果表明，12As、12Cs、12D、13D和14A中的酶活性峰值出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅰ階段;12Bs和12E種質(zhì)的酶活性峰值出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅲ階段;13K種質(zhì)的酶活性峰值出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅳ階段。分析了氫過氧化物裂解酶基因AhHPL1在果實(shí)

4、不同成熟階段的表達(dá)變化，8份種質(zhì)中，除12D中基因表達(dá)峰值出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅲ階段外，其余7份種質(zhì)中的基因表達(dá)峰值均出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅰ階段。此外，12As、12Cs、13D和14A種質(zhì)中酶活性隨著基因表達(dá)量的下降而減弱，而在12Bs、12D、12E和13K種質(zhì)中，酶活性變化與基因表達(dá)變化不一致。
　　3、測定了乙醇脫氫酶在菠蘿蜜果實(shí)不同成熟階段的活性變化，結(jié)果表明，在12As、12Cs和12D種質(zhì)中，ADH酶活性從果實(shí)成熟第Ⅰ階段到

5、第Ⅱ階段顯著下降，隨后維持較低水平;在12Bs和12E中，酶活性一直保持較低水平;在13D、13K和14A種質(zhì)中，酶活性保持較高水平。分析了4個(gè)乙醇脫氫酶基因家族成員(AhADH1、AhADH2、AhADH4和AhADH5)在果實(shí)不同成熟階段的基因表達(dá)變化，4個(gè)基因在8份種質(zhì)間的表達(dá)存在差異，有可能在不同的菠蘿蜜種質(zhì)中，香氣形成過程中起主要作用的乙醇脫氫酶基因存在差異。
　　4、測定了醇?；D(zhuǎn)移酶在菠蘿蜜果實(shí)不同成熟階段的活性變化

6、，結(jié)果表明，AAT酶活性變化在不同種質(zhì)間存在差異。12Cs、13D、13K和14A中酶活性在果實(shí)成熟第Ⅰ階段達(dá)到峰值;12Bs中的酶活性峰值出現(xiàn)在果實(shí)成熟第Ⅱ階段;12As和12E中的酶活性峰值出現(xiàn)在第Ⅲ階段;12D中的酶活性峰值出現(xiàn)在第Ⅳ階段。分析了醇酰基轉(zhuǎn)移酶基因AhAAT1在果實(shí)不同成熟階段的基因表達(dá)變化，結(jié)果表明，AhAAT1基因除在12Bs中較小表達(dá)外，在其余7份種質(zhì)的果實(shí)成熟第Ⅲ階段和第Ⅳ階段中均大量表達(dá)。盡管AAT酶活性與