天然產(chǎn)物中流感病毒核酸內(nèi)切酶PAN抑制劑的篩選與研究.pdf

1、流行性感冒（Influenza，流感）是由流感病毒引起的一類(lèi)急性呼吸道傳染性疾病。目前有效治療該類(lèi)疾病的藥物屈指可數(shù)，且耐藥性病毒亞型的出現(xiàn)迫使我們亟待開(kāi)發(fā)新型、廣譜型抗流感藥物。
　　天然產(chǎn)物具有生物來(lái)源多樣性、化學(xué)成分各異且結(jié)構(gòu)類(lèi)型多樣化等優(yōu)點(diǎn)，是絕佳的藥物篩選樣品庫(kù)。因此，針對(duì)各類(lèi)疾病的特異性靶標(biāo)蛋白進(jìn)行高通量篩選以獲得藥物前體具有重要意義！
　　本課題以流感病毒(A/goose/Guangdong/1/96(H5N1

2、))高保守性核酸內(nèi)切酶PAN為靶標(biāo)蛋白，通過(guò)高通量體外酶活篩選對(duì)天然產(chǎn)物進(jìn)行初篩，核酸膠電泳檢測(cè)復(fù)篩，發(fā)現(xiàn)了一些抗PAN活性顯著的單體，并借助分子模擬和結(jié)構(gòu)修飾研究其抗PAN機(jī)制。
　　首先，構(gòu)建了一個(gè)含1620種植物浸膏、組分的天然產(chǎn)物庫(kù)，從中篩選獲得3種抗PAN顯著的植物:兒茶(AcaciacatechuL.)、連翹(Forsythiasuspense(Thunb.)Vahl）和丹參（SalviamiltiorrhizaBge

3、.），且其乙酸乙酯部位活性最強(qiáng)。利用正相色譜、反相色譜等手段共分得29個(gè)單體，結(jié)合NMR、ESI-MS等信息最終鑒定了其中27個(gè):沒(méi)食子酸甲酯(1)、沒(méi)食子酸乙酯(2)、鄰苯二甲酸二甲酯(3)、兒茶素(4)、表兒茶素(5)、花旗松素(6)、山奈酚(7)、沒(méi)食子酸(8)、(-)-羅漢松脂素(9)、(+)-松脂素單甲基醚(10)、(+)-連翹脂素(11)、鄰苯二甲酸二丁酯(12)、Rengyolone(13)、阿魏酸乙酯(14)、Canna

4、bifolactoneA(15)、咖啡酸(16)、(+)-連翹苷(17)、松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(18)、蘆丁(19)、連翹酯苷A(20)、連翹酯苷B(21)、丹參酮ⅡA(22)、隱丹參酮(23)、槲皮素(24)、丹參素(25)、迷迭香酸(26)、丹酚酸B(27)。單體3、10、12、15為首次從相應(yīng)植物中分得;1、2、8、16、20、21、25～27具有抗PAN活性，且16、25～27抗性顯著，IC50值分別為68.72μM