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1、[目的]:為了解決目前重癥肌無力多種治療方法的局限問題,本實(shí)驗(yàn)擬用免疫調(diào)節(jié)劑胸腺五肽(TP-5)通過對(duì)重癥肌無力動(dòng)物模型(EAMG)進(jìn)行不同藥量和用法的治療來研究胸腺五肽的不同給藥方式對(duì)藥效的影響,進(jìn)而探索TP-5療效檢測(cè)中對(duì)骨骼肌細(xì)胞內(nèi)DNA含量、細(xì)胞膜流動(dòng)性及膜上ATP酶、SOD酶等生物活性指標(biāo)的建立。 [方法]:用乙酰膽堿受體(nAChR)的靶位點(diǎn)26肽片段免疫C57BL/6小鼠獲得EAMG模型。在驗(yàn)證胸腺五肽不同藥效時(shí),
2、EAMG模型分為四組,三個(gè)給藥組及一個(gè)EAMG組,三個(gè)給藥組分別以0.125 mg/天/只,0.25mg/2天/只和0.5mg/4天/只腹腔注射TP-5溶液,給藥期內(nèi)各組小鼠接受的TP-5總量相同。持續(xù)給藥兩周后分別檢測(cè)其CD4+、CD8+細(xì)胞數(shù)量。在進(jìn)行生物指標(biāo)建立時(shí),對(duì)正常對(duì)照組、MG對(duì)照組及療效最好的給藥組檢測(cè)其骨骼肌細(xì)胞內(nèi)DNA含量、細(xì)胞膜流動(dòng)性及膜上ATP酶、SOD酶活性。 [結(jié)果]:MG模型組的CD4+/CD8+比值
3、明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)。三個(gè)給藥組的CD4+/CD8+比值均在正常組和EAMG組之間,說明TP-5起到了調(diào)節(jié)作用。每日給藥組的CD4+/CD8+值為1.037±0.402,仍然顯著高于正常對(duì)照組的0.672±0.139(P<0.01),而與MG模型組沒有顯著性差異;每隔4日給藥組的CD4+/CD8+比值為0.952±0.253,比每日給藥組更接近正常對(duì)照組,但與正常組及EAMG組均無顯著性差異;隔日給藥組的CD4+/CD8+
4、比值0.832±0.115與正常對(duì)照組無顯著性差異,而顯著低于MG模型組的1.112±0.216(P<0.05)。在骨骼肌細(xì)胞指標(biāo)中,MG模型組的DNA濃度和膜流動(dòng)性均明顯低于正常對(duì)照組(P<0.001),隔2日給一次TP-5后其指標(biāo)恢復(fù)正常;骨骼肌細(xì)胞中的SOD活性則無論在正常組,MG模型組或TP-5組中均無差異;檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞膜上的Na+、K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性顯示MG模型組顯著低于正常組(P<0.001),但TP-
5、5治療無助于提升MG模型組的ATP酶,反倒進(jìn)一步降低其活性(P<0.001)。 [結(jié)論]:MG明顯使CD4+/CD8+比值升高,使骨骼肌細(xì)胞膜流動(dòng)性和細(xì)胞膜上的Na+、K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性降低,不影響骨骼肌細(xì)胞的SOD酶活性,卻使細(xì)胞內(nèi)DNA含量升高。TP-5治療能使隨MG病情加重而升高的CD4+/CD8+比值恢復(fù)正常,其免疫調(diào)節(jié)作用以每隔2日給藥一次效果最佳。TP-5治療還能使骨骼肌細(xì)胞內(nèi)DNA含量和細(xì)胞膜流
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