羅格列酮對(duì)野百合堿誘導(dǎo)肺動(dòng)脈高壓大鼠的作用及機(jī)制探討.pdf

1、[背景]
　　 肺動(dòng)脈高壓(pulmonary hypertension，PH)是一組以肺血管阻力持續(xù)增加為特征的具有潛在破壞力的嚴(yán)重疾病，動(dòng)脈型肺動(dòng)脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)是PH的最常見類型之一。血管重構(gòu)是PH發(fā)生發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，目前PH的治療藥物雖可改善患者的臨床癥狀，但不能抑制和逆轉(zhuǎn)肺血管重構(gòu)發(fā)生。近年研究發(fā)現(xiàn)，PH的發(fā)病與過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxis

2、ome proliferator activatedreceptorγ，PPARγ)表達(dá)降低相關(guān)，PPARγ的配體能夠阻止或逆轉(zhuǎn)PH的發(fā)生發(fā)展。羅格列酮是PPARγ的人工合成配體，具有抗炎、抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡分化等作用。本研究擬通過野百合堿(monocrotaline，MCT)誘導(dǎo)PAH的大鼠模型，觀察羅格列酮對(duì)野百合堿誘導(dǎo)PAH大鼠的治療作用。
　　 [目的]
　　 通過觀察羅格列酮對(duì)MCT誘導(dǎo)PAH大鼠一般狀

3、況、肺血流動(dòng)力學(xué)及肺組織病理變化的影響，評(píng)估羅格列酮對(duì)MCT誘導(dǎo)的已形成PAH大鼠的治療作用。
　　 [方法]
　　 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：雄性Sprague—Dawley大鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只：①對(duì)照組(C組)：頸背部皮下注射生理鹽水1次；②PAH模型組(P組)：頸背部皮下注射野百合堿(60mg/kg)1次，并于注射后第21天至第34天連續(xù)給予等體積生理鹽水灌胃(約1.5ml/d)；③羅格列酮高劑量治療PAH

4、組(PRH組)：野百合堿(60mg/kg)頸背部皮下注射1次，并于注射后第21天至第34天連續(xù)給予羅格列酮(每日5mg/kg)灌胃；④羅格列酮低劑量治療PAH組(PRL組)：野百合堿(60mg/kg)頸背部皮下注射1次，并于注射后第21天至第34天連續(xù)給予羅格列酮(每日2.5mg/kg)灌胃。
　　 2.于第35天行右心導(dǎo)管檢查測(cè)定肺動(dòng)脈平均壓(mPAP)、右心室收縮壓(RVSP)；分離心臟，沿室間隔分離右心室，分別稱量右心室、

5、左心室+室間隔，計(jì)算右心室肥厚指數(shù)(RVHI)。
　　 3.肺組織切片HE染色及Elastin Van Gieson(ET+VG)染色，應(yīng)用Image Pro Plus6.0病理圖像分析系統(tǒng)測(cè)定并計(jì)算各組大鼠肺小動(dòng)脈管壁中膜厚度占管壁外徑的百分比(WT％)。
　　 4.采用t檢驗(yàn)及單因素方差分析比較組間差異，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01為差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 [結(jié)果]
　　

6、 1.羅格列酮治療對(duì)MCT誘導(dǎo)PAH大鼠一般情況的影響
　　 從注射MCT2周后開始，P組、PRH組及PRL組的部分大鼠開始出現(xiàn)皮毛凌亂無光澤、呼吸急促、活動(dòng)遲緩的表現(xiàn)，上述情況隨時(shí)間延長(zhǎng)而加重；從注射MCT3周后陸續(xù)出現(xiàn)大鼠死亡現(xiàn)象，C組、P組、PRH組及PRL組大鼠的病死率依次為0、50％、50％及30％；注射MCT3周及5周后，C組大鼠體重分別為(386±14)g及(475±18)g；P組大鼠體重[(335±28)g，(3

7、16±28)g]、PRH組大鼠體重[(331±22)g，(320±43)g]及PRL組大鼠體重[(327±30)g，(296±41)g]均較C組大鼠降低，差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而P組、PRH組及PRL組之間大鼠體重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.羅格列酮治療對(duì)MCT誘導(dǎo)PAH大鼠mPAP、RVSP及RVHI的影響
　　 C組大鼠mPAP、RVSP及RVHI依次為(21.66±2.43)

8、mmHg，(43.76±3.64)mmHg及0.28±0.02；P組大鼠mPAP、RVSP及RVHI[(61.57±7.28)mmHg，(108.65±9.97)mmHg，0.70±0.03]均較C組大鼠顯著升高，差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與P組大鼠比較，PRH組大鼠mPAP、RVSP、RVHI[(58.83±9.47)mmHg，(106.61±11.67)mmHg，0.63±0.07]和PRL組大鼠mPAP、RVSP

9、、RVHI[(56.31±8.44)mmHg，(102.90±11.69)mmHg，0.63±0.071雖略降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，且仍均顯著高于C組大鼠(P<0.01)；PRH組和PRL組大鼠之間，mPAP、RVSP及RVHI差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3.羅格列酮治療對(duì)MCT誘導(dǎo)PAH大鼠肺小動(dòng)脈重構(gòu)的作用
　　 C組大鼠肺組織切片HE染色可見各級(jí)肺動(dòng)脈管壁結(jié)構(gòu)清楚，血管周圍無炎癥細(xì)

10、胞浸潤(rùn)，ET+VG染色可見內(nèi)外彈力板平滑無擠壓；P組、PRH組及PRL組大鼠肺組織切片鏡下表現(xiàn)相似，HE染色可見3組大鼠肌型肺小動(dòng)脈管壁增厚，平滑肌增生肥厚，管腔狹窄，血管外膜腫脹，血管周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腺泡內(nèi)肺微動(dòng)脈“肌型化”，ET+VG染色可見內(nèi)彈力板擠壓呈“波浪狀”改變。C組大鼠肺小動(dòng)脈管壁中膜厚度占管壁外徑的百分比(WT％)為(8.82±3.23)％，P組、PRH組及PRL組大鼠肺小動(dòng)脈WT％[(55.22±5.72)％，(50

11、.92±5.18)％，(52.45±6.45)％]均較C組大鼠顯著增高，差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；而與P組大鼠相比，PRH組大鼠及PRL組大鼠WT％略降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；不同劑量羅格列酮治療組(PRH組及PRL組)大鼠WT％差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.羅格列酮治療不能降低野百合堿誘導(dǎo)大鼠已形成的明顯增高的肺動(dòng)脈平均壓和右心室收縮壓。