乙酰半胱氨酸對(duì)野百合堿誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓的干預(yù)及機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立野百合堿誘導(dǎo)的大鼠肺動(dòng)脈高壓模型，探討激活素受體樣激酶1（activin receptor-like kinase1，ALK-1）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制中的作用，觀察N-乙酰半胱氨酸防治該模型肺動(dòng)脈高壓的作用及可能機(jī)制。
　　方法:將32只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、肺動(dòng)脈高壓模型組、乙酰半胱氨酸低劑量（100mg/kg/d）治療組、乙酰半胱氨酸高劑量（500mg/kg/d）治療組，每組8只。模型組

2、和治療組分別一次性腹部皮下注射野百合堿（60mg/Kg），治療組自注射野百合堿之日起分別用乙酰半胱氨酸100mg/kg/d、500mg/kg/d灌胃，對(duì)照組及模型組僅予等量生理鹽水灌胃，均每日一次，6周后達(dá)實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。觀察各組大鼠的一般情況及生存率，各組干預(yù)結(jié)束后，測(cè)定大鼠平均肺動(dòng)脈壓力（mPAP）,平均右心室壓力（mRVP），計(jì)算右心室肥大指數(shù)[RV/(LV+S)]，HE染色觀察肺小動(dòng)脈結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)用圖像分析系統(tǒng)測(cè)定肺動(dòng)脈管壁厚度與血管

3、外徑百分比（WT％）、管壁面積與血管面積百分比（WA％）以及血管炎癥評(píng)分，以此反應(yīng)肺血管重建情況；免疫組化染色方法檢測(cè)肺小動(dòng)脈中ALK-1、Smad1的表達(dá)及肺動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）分布，TUNEL染色法檢測(cè)肺動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的凋亡情況，分別計(jì)算其平均吸光度；Western Blotting技術(shù)檢測(cè)肺組織中ALK-1和Smad1蛋白的表達(dá)含量。
　　結(jié)果：1、存活情況：實(shí)驗(yàn)6周末結(jié)束時(shí)對(duì)照組、模型組、低劑量

4、治療組、高劑量治療組各組存活率分別為100％、75％、88％、100％。與模型組相比，低劑量、高劑量治療組的存活率明顯升高（P＜0.05）。
　　2、血流動(dòng)力學(xué)測(cè)定、肺小動(dòng)脈形態(tài)學(xué)觀察及右心室肥厚指數(shù)測(cè)定：與對(duì)照組相比，模型組 mRVP、mPAP、RV/(LV+S)顯著升高（P＜0.01），肺小動(dòng)脈管壁明顯增厚，管腔狹窄，炎癥程度、WA％、WT％明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。與模型組相比，治療組中mRVP、mPAP、RV/(LV

5、+S)、炎癥程度、WA％、WT％均顯著下降（P＜0.05），肺動(dòng)脈管壁增厚程度及管腔狹窄程度均顯著減輕（P＜0.05），以高劑量治療組下降更明顯。低劑量與高劑量治療組相比，mRVP、mPAP無(wú)差異性（P＞0.05），RV/(LV+S)、WA％、WT％差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但均未恢復(fù)至對(duì)照組水平（P＜0.01）。
　　3、肺小動(dòng)脈ALK-1、Smad1蛋白表達(dá)：模型組ALK-1、Smad1蛋白較對(duì)照組明顯表達(dá)（P＜0.0

6、1）；低劑量、高劑量治療組表達(dá)較模型組有不同程度下降（P＜0.05），劑量間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），但均未恢復(fù)至對(duì)照組水平（P＜0.05）。
　　4、平滑肌細(xì)胞增殖及凋亡情況：模型組 PCNA平均吸光度顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），低劑量、高劑量治療組較模型組均有不同程度降低（P＜0.05），且劑量間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），但均未下降至對(duì)照組水平（P＜0.01）；模型組TUNEL平均吸光度顯著低于對(duì)照組（P＜0.01

7、），高劑量治療組較模型組明顯升高（P＜0.05），低劑量、高劑量治療組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），但均未升高至對(duì)照組水平（P＜0.01）。
　　5、肺組織ALK-1、Smad1蛋白表達(dá)量：模型組ALK-1蛋白、Smad1蛋白表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高（P＜0.01）；低劑量、高劑量治療組表達(dá)量較模型組有不同程度降低（P＜0.05），劑量間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），但均未恢復(fù)到對(duì)照組水平（P＜0.01）。
　　結(jié)論：ALK