丹參APX和GPX基因克隆及其表達(dá)分析.pdf

1、陜西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文丹參APX和GPX基因克隆及其表達(dá)分析姓名：韓立敏申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：王喆之20070501通過RTPCR的方法獲得s脅G_蹦的cDNA序列，該基因全長535bD，包含一個(gè)501bp的開放讀碼框，編碼166個(gè)氨基酸。運(yùn)用生物信息學(xué)工具對SmGPX的核苷酸序列及其編碼的氨基酸序列進(jìn)行了分析，結(jié)果表明該基因的編碼產(chǎn)物在翻譯后可能在12個(gè)位點(diǎn)發(fā)生了磷酸化修飾，是一不具跨膜結(jié)構(gòu)域的可溶性細(xì)胞質(zhì)型G

2、PX。從其氨基酸序列所含的兩個(gè)磷脂氫谷胱甘肽過氧化酶(PHGPX)的特征序列并結(jié)合前述研究，推測所克隆到的是GPX家族的一特殊成員，即清除ROS保護(hù)生物膜免受氧化損傷的PHGPX。從DNA水平也獲得該基因，Southern結(jié)果表明SmGPX以低拷貝形式存在于丹參基因組中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析顯示SmGPX在丹參根、莖、葉中均有表達(dá)，根中表達(dá)量最低，葉片次之，莖中表達(dá)量最高，莖中表達(dá)量為根中表達(dá)量的678倍；鹽脅迫處理的丹參植株體內(nèi)Sm