硼替佐米對(duì)T-ALL細(xì)胞株CCRF-CEM的作用及對(duì)Notch1通路的影響.pdf

1、目的：1、探討硼替佐米單藥及與MTX聯(lián)合用藥對(duì)T-ALL細(xì)胞增殖的影響；2、研究硼替佐米作用于T-ALL細(xì)胞株后Notch1信號(hào)通路的基因表達(dá)情況，以探討硼替佐米對(duì)T-ALL細(xì)胞株的作用機(jī)制。為T-ALL的治療尋求一種新方法。
　　 方法：1、體外培養(yǎng)T-ALL細(xì)胞株CCRF-CEM。采用MTT方法檢測(cè)單藥組硼替佐米不同濃度（0.25ng/ml，0.5ng/ml，1ng/ml，10ng/ml，20ng/ml,40ng/ml）、單

2、藥組MTX不同濃度(0.25ng/ml，1ng/ml,5ng/ml，10ng/ml，20ng/ml)及硼替佐米與MTX不同濃度聯(lián)合用藥（硼替佐米0.25ng/ml+MTX1.0ng/ml，硼替佐米0.25+MTX10ng/ml，硼替佐米0.25+MTX20ng/ml，硼替佐米0.5+MTX1.0ng/ml，硼替佐米0.5+MTX20ng/ml，硼替佐米0.5+40ng/ml)對(duì)CCRF-CEM細(xì)胞株的作用，比較不同藥物濃度及藥物作用時(shí)間

3、對(duì)CCRF-CEM細(xì)胞株的生長抑制情況；2、選擇不同濃度的單藥硼替佐米作用于細(xì)胞株不同時(shí)間(24h,48h，72h)后，收集細(xì)胞；Trizol方法提取細(xì)胞總RNA，在一定的反應(yīng)體系中逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)Notch1、Hes、Myc、NF-KB1在mRNA水平的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、MTT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)硼替佐米、MTX對(duì)CCRF-CEM細(xì)胞株的增殖具有明顯的抑制作用(p＜0.05)，且隨著藥

4、物濃度的增加和時(shí)間的增加，抑制作用越明顯；
　　 2、硼替佐米和MTX的聯(lián)合作用明顯大于單藥使用之和；
　　 3、PCR結(jié)果顯示細(xì)胞株在硼替佐米作用后Notch1和NF-KB1表達(dá)量明顯降低(P＜0.05)；而Myc及Hes基因表達(dá)與對(duì)照組相比無明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、硼替佐米及MTX可以明顯抑制CCRF-CEM細(xì)胞株的增殖；
　　 2、硼替佐米能增強(qiáng)MTX對(duì)CCRF-