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1、目的:本試驗(yàn)通過研究硼替佐米(bortezomib,萬珂)體外誘導(dǎo)急性髓系白血病細(xì)胞株SHI_1細(xì)胞增殖和凋亡的影響及蛋白PI3K、Akt、P-Akt、caspase-3的表達(dá),探討其對(duì)急性髓系白血病作用機(jī)制。
方法:將不同濃度bortezomib(0、5、50、100、150ng/ml)作用于SHI_1細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡。四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制,Westernblotting測(cè)定PI3K、Akt
2、、P-Akt、caspase-3蛋白表達(dá)。
結(jié)果:5-100ng/mLbortezomib可有效抑制SHI_1細(xì)胞增殖,并誘導(dǎo)其凋亡,隨著濃度增加及作用時(shí)間延長(zhǎng)可使細(xì)胞凋亡率明顯增加(P<0.01)。其中50ng/mL劑量處理SHI_1細(xì)胞12小時(shí)即能抑制細(xì)胞增殖,且具有時(shí)間和劑量依賴性(P<0.01)。Westernblotting測(cè)定結(jié)果表明:隨著藥物濃度的增加,Akt表達(dá)無明顯變化,PI3K、P-Akt的表達(dá)逐漸下降,1
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