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1、目的：探討Shh信號(hào)傳導(dǎo)途徑在原代培養(yǎng)皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激中的保護(hù)作用。
方法：本實(shí)驗(yàn)在華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室及神經(jīng)內(nèi)科實(shí)驗(yàn)室完成。1.取出生后1-3天SD新生鼠皮層膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，并給予過(guò)氧化氫模擬氧化應(yīng)激，用Real-time PCR以及Western-blot檢測(cè)內(nèi)源性Shh、Patched、Gli-1的表達(dá)；2.原代培養(yǎng)的皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激中給予外源性Shh，及Shh信號(hào)傳導(dǎo)通路阻
2、滯劑Cyclopamine或5E1處理，用MTT方法觀察細(xì)胞的活力；用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡狀況；3.用RT-PCR和Western-blot觀察藥物處理后細(xì)胞中Bcl-2和Bax的表達(dá)變化。
結(jié)果：1.皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激時(shí)內(nèi)源性Shh、Patched、Gli-1的表達(dá)上調(diào)；2.給予外源性Shh可明顯增加皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激時(shí)細(xì)胞的存活力，減少細(xì)胞的凋亡，Cyclopamine或5E1可部分抑制該作用；3.外源性
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