C-EBPα基因突變對急性髓系白血病(AML)臨床預(yù)后影響.pdf

1、研究背景：AML的發(fā)病基礎(chǔ)一般認(rèn)為是由多因素誘導(dǎo)基因突變導(dǎo)致細(xì)胞增殖、分化和細(xì)胞凋亡途徑發(fā)生改變的結(jié)果。作為C/EBP(C/EBP)家族成員之一的髓系轉(zhuǎn)錄因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白-α(C/EBPα)是髓系祖細(xì)胞增殖與分化過程中一個重要的轉(zhuǎn)錄因子，C/EBPα在AML造血干細(xì)胞增殖與分化進(jìn)程中扮演著極為重要的角色，最新公布的WHO白血病分類標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)在初診評估時就應(yīng)對AML患者骨髓樣本進(jìn)行C/EBPα突變以及與之預(yù)后相關(guān)的FLT3和N

2、PM1基因突變分析。C/EBPα已成為AML重要的預(yù)后參考指標(biāo)之一，可能成為新的治療靶點，其功能的破壞、喪失常與AML的發(fā)生有關(guān)，恢復(fù)C/EBPα表達(dá)可以作為誘導(dǎo)分化治療手段。研究表明，AML患者C/EBPα基因突變主要為N-端移碼突變和C-端bZIP區(qū)域結(jié)構(gòu)性突變，這種突變的存在對提高患者的EFS、OS和RD具有重要意義。有基因突變與低復(fù)發(fā)率和高存活率密切相關(guān)，C/EBPα突變檢測的準(zhǔn)確性對于AML患者治療與預(yù)后的風(fēng)險分級具有重要意義

3、。
　　 目的：檢測AML患者中C/EBPα基因突變情況；比較PCR直接測序法和多重PCR片段法在C/EBPα基因突變檢測中的性能；分析C/EBPα突變與患者臨床特征之間的關(guān)系；觀察突變患者和非突變患者接收誘導(dǎo)緩解治療后的臨床療效。
　　 方法：首先采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)直接測序法分別檢測60例AML患者骨髓樣本和10例體檢健康志愿者外周血樣本。而后用多重PCR片段分析法再次檢測C/EBPα突變AML患者的骨髓樣本

4、。采用獨立樣本t檢驗分析C/EBPα突變與患者臨床特征之間的關(guān)系；采用Chi-square檢驗分析患者CR率；用Kaplan-Meier進(jìn)行患者生存分析，分析患者的RD和OS;采用log-rank檢驗分析突變患者和非突變患者的RD和OS之間差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、PCR直接測序分析結(jié)果表明，60例AML患者中的C/EBPα突變患者8例（發(fā)生率13.3％），包括雙等位基因突變5例(發(fā)生率62.5％），單基因突變患者

5、3例（發(fā)生率37.5％），其中僅有1例出現(xiàn)N-端移碼突變；
　　 2、多重PCR片段分析法分析檢測8例C/EBPα突變AML患者骨髓樣本，與PCR直接測序法相比，1例患者未檢測到N-端移碼突變，準(zhǔn)確度為93％;
　　 3、有無C/EBPα突變與AML患者的性別、年齡、白細(xì)胞計數(shù)、骨髓原始細(xì)胞數(shù)和血小板計數(shù)無關(guān)，但突變患者的血紅蛋白數(shù)要高于非突變患者；
　　 4、本研究尚未發(fā)現(xiàn)CD7和C/EBPα-WT之間的負(fù)相關(guān)

6、關(guān)系，AML患者中C/EBPα-CD7+和C/EBPα+CD7-并不是交替出現(xiàn)，無統(tǒng)計學(xué)意義，60例患者中除了C/EBPα-CD7+和C/EBPα+CD7-類型的患者還有其它類型的患者，但C/EBPα突變患者中尚未檢測到CD7+表達(dá)；
　　 5、C/EBPα基因突變患者的CR、OS和RD較非突變患者要高，但其差異無統(tǒng)計學(xué)意義；
　　 6、C/EBPα+CD7-患者的CR率(87.5％)和R(9.25，95％CI:7.78

7、-10.72)要明顯高于C/EBPα-CD7+的CR率(25％)和R(5.188,95％CI：3.325-7.050),兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究表明AML患者C/EBPα基因突變發(fā)生率約13.3％，其中雙等位基因發(fā)生率為62.5％；
　　 2、盡管PCR直接測序是一種準(zhǔn)確度高的C/EBPα突變檢測方法，但綜合運用PCR直接測序法和多重PCR片段分析法是未來臨床應(yīng)用的一個趨勢；