2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、花生是世界糧農(nóng)組織(FAO，1995)認(rèn)定的八大類食物過(guò)敏原之一。相對(duì)其它食物過(guò)敏而言，花生過(guò)敏發(fā)生率較高、臨床癥狀更為嚴(yán)重，且不容易隨年齡的增長(zhǎng)而產(chǎn)生免疫耐受，在公共衛(wèi)生和食品安全領(lǐng)域倍受人們的關(guān)注。因此，建立準(zhǔn)確、靈敏、快速地檢測(cè)花生過(guò)敏原的方法具有重要意義。 本研究主要內(nèi)容包括花生過(guò)敏原．Ara h2的分離純化、兔抗Ara h2多克隆抗體的制備及間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)Ara h2方法的建立。 研究中以四粒紅花生(

2、Arachis hypogaea L.)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，經(jīng)粉碎、脫脂、蛋白抽提、陰離子交換層析、SDS-PAGE電泳回收，得到了電泳純(純度>95％)的Ara h2純品，建立了DEAE-Sepharose Fast Flow結(jié)合SDS-PAGE電泳回收分離Am h2的方法。 在制備抗Ara h2抗體過(guò)程中，以純化的Ara h2為抗原，初次免疫采用弗式完全佐劑，加強(qiáng)免疫采用弗式不完全佐劑，皮下多點(diǎn)免疫，每隔兩周加強(qiáng)免疫一次，共計(jì)免疫

3、6次，每次免疫劑量為200μg/只。首次免疫12周后，經(jīng)ELISA檢測(cè)和雙向瓊脂擴(kuò)散法檢測(cè)，抗體效價(jià)分別為1:200000及1:16。雙向瓊脂擴(kuò)散的交叉試驗(yàn)表明，Ara，h2特異性好，與大豆蛋白、雞蛋清蛋白、BSA均無(wú)交叉反應(yīng)。此實(shí)驗(yàn)建立了間接ELISA檢測(cè)．Am h2抗體效價(jià)的檢測(cè)方法及制備抗Ara h2多克隆抗體的操作程序。 在用板外競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)模式建立Ara h2的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法過(guò)程中，用160ng/mL抗原包被

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