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1、遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文TGFβ和bFGF單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)人牙周韌帶成纖維細(xì)胞增殖的影響姓名:馮萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):口腔內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師:劉琪20031101遵義醫(yī)‘竽院2004屈壩IⅢ究生畢業(yè)l侖土TGF13。和bFGF單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)人牙周韌帶成纖維細(xì)胞增殖的影響研究生馮萍導(dǎo)師劉琪摘要目的:觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子p,(transforminggrowthfactorp,GFB)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basjcfibroblastgr
2、owthfactor,bFGF)單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周韌帶成纖維細(xì)胞(periodontal1iffamentfLbroblasts,PDLFS)增殖、細(xì)胞周期及細(xì)胞周期素D(cyclinDI)表達(dá)的影響,探討兩者影響細(xì)胞增殖的可能作用機(jī)制。方法:采用組織塊培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行人PDLFs的體外培養(yǎng),通過四唑鹽比色法[3一(4,5~dimethylthiazol2y1)25diphenyltetrazoliumbromide岍]、流式細(xì)胞術(shù)(F
3、cM)和免疫組化方法,檢測(cè)TGF—B,、bFGF單獨(dú)及聯(lián)合使用時(shí)人PDLFs的增殖情況以及細(xì)胞周期、cyclinD表達(dá)的改變。結(jié)果;(】)、0卜lOOng/mlTGFB、卜100ng/mlbFGF單獨(dú)使用時(shí)均有促進(jìn)人PDLFs增殖的作用,其最佳作用濃度均為lOng/ml。第1天促增殖作用不明顯,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖數(shù)量與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(pO05)。細(xì)胞培養(yǎng)至第3天,實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組細(xì)胞出現(xiàn)明顯的增殖,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異(pO05
4、),提示最佳顯效時(shí)間為第3天。這種促增殖的趨勢(shì)一直持續(xù)到第七天。兩者最佳濃度的聯(lián)合促增殖效應(yīng)較單獨(dú)使用時(shí)明顯(pO05),并且也具有時(shí)間依賴效應(yīng),同樣為從第3天起可見明顯的促細(xì)胞增殖作用,并且這種作用一真持續(xù)到第7天,統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果具有顯著性差異(pn05)。(2)、TGF一13I、bFGF均可以促進(jìn)人PDLFs從G期向s期的轉(zhuǎn)變,可見處于G,期的細(xì)胞比例減少而處于S期和G!M期的細(xì)胞比例增加,即增殖指數(shù)PrI(SG:M)%升高。當(dāng)兩者聯(lián)合
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