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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:1.探討肺癌患者外周靜脈血血小板活化標(biāo)志物水平的改變;
2.探討依托咪酯對(duì)肺癌患者外周靜脈血血小板活化標(biāo)志物水平的影響。
方法:
1.標(biāo)本的采集與處理
采集10名健康志愿者空腹外周靜脈血2ml,放入3.8%抗枸櫞酸鈉抗凝試管中(血液:抗凝劑為9:1)為對(duì)照組E組。采集40例肺癌患者抽取空腹外周靜脈血2ml,加入3.8%枸櫞酸鈉抗凝試管中(血液:抗凝劑為9:1),分為4組(A組
2、、B組、C組、D組),4組中2ml全血中分別加入依托咪酯使其最終濃度為0、0.2、2、20μg·ml-1,室溫孵育5 min。
2.CD62p、CD41表達(dá)水平的檢測(cè)
健康患者及肺癌患者的血液標(biāo)本處理后,于1小時(shí)內(nèi)嚴(yán)格按照說明書用全血流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板CD62p、CD41/61表達(dá)水平:取10μl熒光標(biāo)志抗體FITC-CD62p、FITC-CD41分別加入兩試管中,各加100μL,PBS液混勻后,再加入待測(cè)
3、標(biāo)本100μl,以FITC-IgG作為陰性對(duì)照,避光室溫孵育30分鐘,加入2mlPBS液終止反應(yīng)。在流式細(xì)胞儀分析,以FSC和SSC設(shè)門收集10000個(gè)血小板,計(jì)算10000個(gè)血小板中與熒光抗體FITC-CD62p、FITC-CD41結(jié)合的陽(yáng)性血小板數(shù),陽(yáng)性血小板百分率即為CD62p、CD41/61表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.病例組A組血小板CD62p(37.1~20.3)%、CD41/61(97.18~1.4)
4、%顯著高于對(duì)照組E組血小板CD62p(3.27±1.9)%、CD41/61(93.08±3.4)%(P
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