食品及保健食品中?；撬岬腇MOC柱前衍生—高效液相色譜測定方法研究.pdf

1、本文建立了食品及保健食品中?；撬?taurine)的FMOC柱前衍生-反相高效液相色譜測定方法。在硼酸鹽緩沖溶液存在的弱堿性(pH=8.0)環(huán)境中樣品中的牛磺酸與9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)在40℃水浴中反應生成衍生化產物，用反相高效液相色譜法檢測定量。本研究對衍生化試劑的選擇及其濃度和用量、衍生化反應進行環(huán)境的酸堿度及時間和溫度、色譜柱的選擇、流動相的組成和配比、流動相的流速、色譜柱的柱溫、紫外檢測波長等實驗條件進行了優(yōu)化，在此基礎上

2、確定了最佳分析條件。衍生化反應條件：準確吸取100μl標準溶液或樣品溶液，加入400μl衍生試劑(1.50g／L)及等體積的硼酸鹽緩沖溶液(0.30mol／L，pH=8.0)，用色譜純乙腈定容至1.0ml，超聲振蕩3min，40℃水浴反應10min。色譜分析條件：色譜柱：C<,18>柱，5μm，250×4.6mm(phenomenex GEMINI)；流動相：甲醇：0.025mol／L磷酸二氫鉀緩沖溶液(pH=8.0)=75：25(V/

3、V)；流速：1.0ml／min；柱溫：40℃；檢測波長：265nm。 本法絕對檢測限為46ng；相對標準差(RSD)范圍為1.32％～5.15％。 飲料樣品：飲料成分較為簡單，故可直接分析。當樣品含量過高，超過標準曲線的線性范圍時，可用蒸餾水做適當倍數(shù)的稀釋，取100μl進行衍生化反應后，進樣分析。飲料樣品的加標回收率范圍為95.6％～108％。 奶粉樣品：稱取奶粉樣品3.0g于15ml干燥、潔凈的燒杯中，加入

4、5.Oml蒸餾水溶解。靜置15min后，取0.5ml混勻的溶液用5.Oml色譜純甲醇沉淀蛋白。以2100rpm離心30min，取上清液過濾，取中段濾液10μl進行衍生化反應后，進樣分析。奶粉樣品的加標回收率范圍為82.8％～96.7％。 保健食品樣品：①水溶性保健食品：稱取1.OOg樣品溶于5.0ml蒸餾水中，超聲振蕩混勻5min。過濾，取中段濾液10μl進行衍生化反應后，進樣分析。當樣品濃度過高，超過標準曲線的線性范圍時，可用

5、蒸餾水做適當倍數(shù)的稀釋，取稀釋液進行衍生化反應后，進行分析。②脂溶性保健食品：膠囊類，取膠囊內容物0.10g；非膠囊類，稱取樣品O.10g。樣品溶解于5.0ml石油醚中，用小玻棒助其完全溶解后，轉移至50ml分液漏斗中，以20ml蒸餾水分3次提取(第1次10ml，后2次均為5.0ml)。待分層界限清晰后，取下層水層。合并3次提取液，過濾，取中段濾液10μl進行衍生化反應后，進樣分析。保健食品的加標回收率范圍為82.3％～108％。