人骨髓間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立一種體外無血清培養(yǎng)擴增入骨髓間充質(zhì)干細胞的方法，為骨組織工程研究提供種子細胞。 方法:從5例手術(shù)病人骨髓中分離制備單個核細胞懸液。分別接種于有血清培養(yǎng)基及自制的無血清培養(yǎng)基中，比較兩種培養(yǎng)條件下細胞生長情況，流式細胞儀分析兩種培養(yǎng)條件下間充質(zhì)干細胞表面CD分子表達情況及細胞周期。 結(jié)果:有血清培養(yǎng)2～3天后細胞開始出現(xiàn)貼壁生長，1周左右有細胞叢生長，12～14天細胞融合成片，呈典型的旋渦狀排列。無血清培養(yǎng)4～5

2、天后細胞開始出現(xiàn)貼壁生長，8～10天左右有細胞叢生長，16～20天細胞融合成片。單層融合的MSCs消化傳代培養(yǎng)，有血清培養(yǎng)1周左右達融合，無血清培養(yǎng)9～10天左右達融合，可繼續(xù)傳代擴增。流式細胞儀檢測顯示，兩種培養(yǎng)條件下擴增后的人骨髓MSCs均不表達CD14，CD34和CD45，而強表達CD29、CD54、CD105；無血清培養(yǎng)組G0/G1期細胞比例明顯高于有血清培養(yǎng)組(P<0.05)。 結(jié)論: 1.利用自行配制的無血清

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