表達狂犬病毒糖蛋白的重組新城疫病毒抑制肺腺癌細胞株遷移活性研究.pdf

1、目的:將表達狂犬病毒糖蛋白的重組新城疫病毒(Newcastle disease virus expressing therabies virus glycoprotein，rl-RVG)感染至體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細胞、小鼠肺腺癌LA795細胞，觀察重組新城疫病毒rl-RVG對肺腺癌細胞株A549、LA795的遷移影響，初步探討重組新城疫病毒抑制細胞遷移及其可能的機制。
　　方法:重組新城疫病毒rl-RVG直接感染A549、L

2、A795細胞為rl-RVG實驗組，新城疫病毒LaSota株處理的A549、LA795細胞組及未感染病毒的A549、LA795細胞組各自代表NDV對照組及空白對照組。Western blot法檢測新城疫(Newcastle disease virus，NDV)血凝素-神經(jīng)氨酸酶糖(HN)蛋白及狂犬病毒糖蛋白(Rabies Virus Glycoprotein，RVG)，細胞增殖實驗測定新城疫病毒使用的最佳作用濃度;劃痕實驗及Transwe

3、ll法測A549遷移;免疫熒光法檢測MMP2蛋白表達;Western blot法檢測E-cadherin、MMP2蛋白表達。
　　結果:空白對照組無NDV、rl-RVG表達，rl-RVG僅在感染rl-RVG細胞組有表達，NDV在感染rl-RVG細胞組及感染NDV細胞組皆有表達;與空白對照組相比，rl-RVG及NDV稀釋濃度大于5×10-5對細胞的增殖有抑制作用(P＜0.05); rl-RVG組遷移的距離及細胞數(shù)明顯減少(P＜0.0

4、5)。與空白對照組及NDV感染組相比，免疫熒光法顯示rl-RVG組MMP2蛋白表達水平減弱(P＜0.05)，MMP2蛋白表達水平下降(P＜0.05); Western blot法顯示rl-RVG組E-cadherin蛋白表達水平上調(P＜0.05)，MMP2蛋白表達水平下降(P＜0.05)。
　　結論:成功構建的重組新城疫病毒rl-RVG能穩(wěn)定、高效地轉染致人肺腺癌A549、小鼠肺腺癌LA795的遷移抑制，并可能通過影響肺腺癌A5