鈾礦塵對巨噬細胞毒性作用及TGF-β1表達的影響.pdf

1、目的：探討鈾礦塵作用小鼠巨噬細胞不同時間后的細胞毒性作用及鈾礦塵誘導(dǎo)巨噬細胞表達TGF-β1的影響。
　　方法：采用小鼠巨噬細胞系 RAW264.7細胞株，進行體外細胞培養(yǎng)實驗，實驗分別設(shè)鈾礦塵實驗組和無粉塵培養(yǎng)基對照組。實驗組用120μg/ml的鈾礦塵混懸液與RAW264.7細胞分別作用2、4、8、16、24、32h后，通過MTT實驗、HE染色、AO/EB染色等方法觀察鈾礦塵對RAW264.7增殖活性、細胞形態(tài)及細胞凋亡的影響；

2、利用比色法測定細胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA水平的變化；應(yīng)用ELISA法測定鈾礦塵對RAW264.7細胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1水平的影響。
　　結(jié)果：鈾礦塵混懸液作用RAW264.7細胞2、4、8、16、24、32h后，MTT實驗結(jié)果顯示，RAW264.7細胞增殖活性明顯降低（與對照組比較，P＜0.05），并且隨著染塵時間的延長，RAW264.7細胞的存活率逐漸降低；HE染色可見，隨著染塵時間的延長，鈾礦塵組梭型或不規(guī)

3、則型細胞數(shù)目上升，多核細胞數(shù)明顯增加，細胞胞質(zhì)缺失，胞核外露、染色變淺，細胞形態(tài)變化較大；AO/EB染色發(fā)現(xiàn)，鈾礦塵組紅色或橙色的凋亡/壞死細胞明顯增多，并且隨著染塵時間的延長，壞死和凋亡細胞數(shù)目逐漸增加；比色法測定細胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2及MDA含量發(fā)現(xiàn)，鈾礦塵組細胞培養(yǎng)上清液中·OH、H2O2、MDA水平明顯升高（與對照組比較，P＜0.05），并且隨著染塵時間的延長，其水平持續(xù)升高；ELISA實驗結(jié)果顯示，鈾礦塵能夠引起RA