c-Met抑制劑PHA665752能夠在體內(nèi)促結直腸癌對放射線的敏感性.pdf

1、結直腸癌是最常見的惡性腫瘤，據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)2014年發(fā)布的《世界癌癥報告》，2012年全世界患病率排前三癌癥的依次為肺癌(180萬)、乳癌(170萬)和大腸癌(140萬)，其中結直腸癌致死率排第四位。而在我國新增癌癥病例306萬例，死亡220萬例，其中直腸癌的發(fā)病率位居第四。
　　目前，對于局部進展期的直腸癌患者（cT3/T4和/或cN+），術前新輔助同步放化療(chemoradiotherapy，CRT)已成為公認標準

2、的治療規(guī)范，且有的學者主張結腸癌T4期的患者給予術前放療。新輔助放化療旨在通過治療使腫瘤縮小、病理降級以及臨床降期，來增加手術根治性切除率。然而局部進展期的直腸癌患者對于新輔助放化療的反應程度并不樂觀，從完全的病理緩解到完全抵抗，患者的個體反應差異很大。這樣，許多患者接受了不必要的甚至是有害的治療，同時也延誤了手術的時機，形成過度治療，使患者承擔了額外的痛苦及負擔。因此，很有必要探討直腸癌對放化療抵抗的機制，尋找可以增加腫瘤對放化療的敏

3、感性的靶點，為腫瘤患者的綜合治療提供依據(jù)，從而實現(xiàn)真正意義上的個體化治療。
　　c-Met是酪氨酸激酶受體家族（receptor tyrosine kinases，RTKs）的成員之一，在結直腸癌細胞中過量表達，且與腫瘤增殖、遷移、侵襲、腫瘤血管形成及肝轉移密切相關。另外，其特異性配體為肝細胞生長因子/離散因子(HGF/SF)，在外周血血清中和腫瘤組織中的HGF表達水平明顯升高，提示我們c-Met可以成為結直腸癌治療的重要靶點。目

4、前，c-Met抑制劑和HGF拮抗劑已經(jīng)應用于結直腸癌的研究，但是缺乏對于靶向抑制c-Met聯(lián)合放療及化療的研究。
　　在前期體外實驗中，我們采用慢病毒介導的可調(diào)控誘導小干擾RNA(small interfering RNA，siRNA)技術，發(fā)現(xiàn)適當沉默c-Met的表達可以增加結直腸癌細胞SW620對放化療的敏感性。本課題則研究:在體內(nèi)，靶向抑制c-Met對結直腸癌放射治療效果的影響。
　　目的:建立人結直腸癌SW620細胞

5、系裸鼠體內(nèi)種植模型，待成瘤后給予c-Met小分子抑制劑(PHA665752)以及聯(lián)合放射治療，探討靶向抑制c-Met與直腸癌新輔助放療敏感性的關系。
　　方法:
　　1建立人結直腸癌細胞SW620的動物種植瘤模型。
　　2待成瘤后隨機進行分組，給予不同處理:對照組(DMSO組)，c-Met抑制劑組，放療組，抑制劑+放療組。
　　3將殘存的瘤組織行石蠟包埋切片，應用免疫組織化學染色法檢測瘤組織中E-cadherin

6、、Vimentin、HIF-1α、γ-H2AX的蛋白表達情況;應用原位末端轉移酶標記技術(TUNEL)檢測瘤體組織細胞凋亡情況。
　　結果:
　　1各實驗組瘤體積與對照組相比，瘤體積顯著減小，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);放療+PHA組與放療組相比，瘤體積顯著減小，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　2免疫組化染色結果顯示，放療+PHA組與放療組相比較，E-cadherin表達量顯著升高(P＜0.01)，V