端粒梅RNA基因在子宮頸上皮內(nèi)瘤變1級與2級鑒別診斷中的意義.pdf

1、目的:近年來由于檢測技術(shù)和診斷水平的提高以及人們防治癌癥意識的增強，子宮頸上皮內(nèi)瘤變(cervicalintraepithelialneoplasia，CIN)的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。CIN作為子宮頸癌前病變，其進展為子宮頸癌是一個長期緩慢的過程，早期診斷和恰當?shù)闹委熗耆赡茏柚蛊浒l(fā)展為子宮頸癌，并且徹底治愈。目前婦科臨床就CIN的治療原則而言:病理診斷學CIN1級可采取保守治療、局部燒灼或隨訪觀察，而CIN2級則需要LEEP刀環(huán)形錐切

2、術(shù)等手術(shù)治療;故病理學檢查正確診斷CIN1級與CIN2級對婦科臨床治療的指導(dǎo)意義是顯而易見的。然而病理學診斷是形態(tài)學與經(jīng)驗學的方法，有時由于個人主觀經(jīng)驗的影響以及病變自身不典型等因素，很難將CIN1級與CIN2級準確地鑒別出來，從而導(dǎo)致一些病例治療不足或治療過度。因此迫切需要一種敏感、準確、穩(wěn)定與客觀的方法或指標來輔助病理學診斷。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，子宮頸鱗狀上皮從癌前病變到子宮頸癌的轉(zhuǎn)變過程中，幾乎都伴有3號染色體長臂拷貝數(shù)增加尤其是T

3、ERC基因的拷貝數(shù)增加，亦有研究證實子宮頸細胞學檢測TERC基因在鑒別子宮頸高度癌前病變與低度癌前病變的敏感性及特異性均為90％以上[1]，由此推論在組織學上檢測TERC基因的拷貝數(shù)是否增加有助于CIN1級與CIN2級的準確診斷。我們前期在密集型組織芯片上對子宮頸癌和CIN的TERC基因的研究有相似的發(fā)現(xiàn)。
　　 本研究在自制密集型子宮頸組織芯片的基礎(chǔ)上，采用FISH技術(shù)在組織學上檢測TERC基因，探討其在CIN1級與CIN2級

4、組織中的拷貝數(shù)增加情況，并依據(jù)TERC基因檢測結(jié)果對組織學上診斷不明確的CIN1/CIN2級病變進行明確分級，對檢測TERC基因輔助明確CIN1/CIN2的診斷與鑒別診斷中的作用及其在臨床病理中的實用價值進行探討。
　　 方法:
　　 1收集河北省人民醫(yī)院子宮頸切除組織樣本共153例，其中正常宮頸鱗
　　 狀上皮組織樣本20例，CIN1級組織樣本55例，CIN2級組織樣本55例，CIN1/CIN2級組織樣本23例

5、。
　　 2應(yīng)用自制組織芯片技術(shù)，將153例標本組織按照點陣形式依次置于受體蠟?zāi)Ｖ?，融合、切片制成需要的密集型組織芯片。
　　 3采用熒光原位雜交技術(shù)檢測TERC基因在正常宮頸鱗狀上皮、宮頸CIN組織中的基因拷貝情況。
　　 4采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，以α=0.05為檢驗水準，當P＜0.05時具有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果:
　　 1組織芯片制備及染色結(jié)果根據(jù)課題設(shè)計方案及試驗方

6、法要求共制作8×9、6×7密集型陣列組織芯片3張，組織點陣排列整齊，無位移現(xiàn)象，其中有7個組織位點缺失，9個組織位點無意義;其他位點均為有意義的組織，最終共得有意義樣本137例（正常宮頸鱗狀上皮組織20例，CIN1級組織46例，CIN2級組織49例，CIN1/CIN2級組織22例），組織芯片位點的形態(tài)可觀測率為89.54％。HE染色鮮有脫片、異位及皺折，熒光原位雜交信號均清晰、背景干凈。
　　 2TERC基因在子宮頸上皮不同病變

7、中的擴增情況采用熒光原位雜交(FISH)方法檢測有意義標本，包括宮頸正常鱗狀上皮組織20例，CIN1級組織46例，CIN2級組織49例，CIN1/CIN2級組織22例中鱗狀上皮組織TERC基因的擴增情況。結(jié)果顯示:正常宮頸鱗狀上皮組中TERC基因無擴增，CIN1級組中TERC基因擴增的情況為15.2％(7/46)，CIN2級組中TERC基因擴增的情況為47％(23/49)，并且出現(xiàn)大量的三倍體、四倍體及非整倍體擴增，兩組之間差異具有統(tǒng)計

8、學意義(p＜0.05)。CIN1/CIN2級病變組TERC基因擴增的情況為27.8％(5/22)。組間兩兩比較:正常宮頸鱗狀上皮組與CIN1級組組間比較差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05）;正常宮頸鱗狀上皮組與CIN2級組組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);CIN1級組與CIN2級組組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05）。TERC基因擴增在鑒別CIN1級病變與CIN2級病變中敏感度為46.9％，特異度為84.7％，準確度為65.0％

9、，陽性預(yù)測值為76.6％，陰性預(yù)測值為60％。
　　 結(jié)論:
　　 1FISH檢測TERC基因擴增在正常宮頸鱗狀上皮組織中無擴增，在CIN1級病變中有少量擴增，CIN2級病變中擴增明顯增多，并且出現(xiàn)三倍體、四倍體及多倍體。在鑒別診斷CIN1級病變與CIN2級病變時有明顯的臨床實用價值。
　　 2FISH檢測TERC基因擴增在鑒別CIN1級病變與CIN2級病變時有較高的特異度、陽性預(yù)測值及準確度，對于判斷CIN病變