多肽及γ鏈細(xì)胞因子對慢性HBV感染者CD8+T細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)影響.pdf

1、乙型病毒性肝炎(viral hepatitis B)，簡稱乙肝，是由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染人體引起的傳染性疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在世界范圍內(nèi)慢性HBV感染者約有3.5億人，而每年由病毒性肝炎引起的相關(guān)疾病死亡人數(shù)近60萬人。慢性乙型病毒性肝炎(chronic hepatitis B，CHB)流行病學(xué)最新調(diào)查表明，我國HBV攜帶率為7.18％。
　　慢性乙型病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制尚未研究明確，但研究發(fā)現(xiàn)

2、乙型肝炎病毒感染的慢性化主要是病毒誘導(dǎo)機(jī)體對其感染形成的一種持續(xù)的免疫耐受狀態(tài)，特別是與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（Cytotoxic T cell,CTL）低反應(yīng)狀態(tài)和功能耗竭有關(guān)。在慢性乙型病毒性肝炎感染過程中，γ鏈（Gamma-Chain,γC）細(xì)胞因子和免疫負(fù)性調(diào)節(jié)分子 T淋巴細(xì)胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing molecule-3

3、，Tim-3)都參與了對CD8+T淋巴細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)，繼而影響機(jī)體殺傷病毒和清除病毒的能力。本研究通過給予慢性乙型病毒性肝炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells，PBMC)γC細(xì)胞因子和抗原等誘導(dǎo)刺激，檢測CD8+T淋巴細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)情況，探討它們與Tim-3高表達(dá)之間的相關(guān)性，為進(jìn)一步明確慢性乙型病毒型肝炎的發(fā)病機(jī)制，尋找更佳的免疫治療方法奠定基礎(chǔ)。
　　目的：給予抗

4、原和γC細(xì)胞因子等刺激，檢測慢性乙型肝炎病毒感染者 PBMC中CD8+T細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)情況，研究它們對Tim-3的表達(dá)影響作用。
　　方法：1.收集56例無癥狀HBV攜帶者，114例初治的慢性乙型肝炎患者和50例健康人的外周血，同時(shí)收集相關(guān)的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、HBV DNA定量等臨床資料；2.采用淋巴細(xì)胞分離技術(shù)獲取慢性乙型肝炎患者和健康人的PBMC，并凍存；3.將PB

5、MC按分組單獨(dú)或聯(lián)合給予抗原、多肽、γC細(xì)胞因子、γC細(xì)胞因子中和抗體等刺激；采用流式細(xì)胞術(shù)檢測CD8+T細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)情況。4.分析多肽和γC細(xì)胞因子等因素對CD8+T細(xì)胞上Tim-3的表達(dá)影響。
　　結(jié)果：1.HBV多肽、γC細(xì)胞因子單獨(dú)、兩者聯(lián)合和協(xié)同抗人CD3/CD28單克隆抗體（Anti-Human CD3/CD28 Functional Monoclonal Antibody，Anti-CD3/CD28）刺激，