改良組織工程血管構(gòu)建技術(shù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的：
　　組織工程血管(tissue engineered blood vessel,TEBV)作為一種理想的血管替代物,具有良好的臨床應(yīng)用前景。構(gòu)建TEBV的傳統(tǒng)方法是將單純的血管平滑肌細(xì)胞(smooth muscle cells,SMCs)種植到血管支架上,以構(gòu)建血管管道;將血管內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells,Ecs)種植到血液接觸面上,以構(gòu)建血管內(nèi)膜,最終完整構(gòu)建TEBV。在構(gòu)建內(nèi)膜時(shí),一般采用多點(diǎn)注射

2、細(xì)胞懸液的方法將Ecs種植到材料表面,但這種方法的接種效率不高,也不利于Ecs在材料表面的均勻分布;在構(gòu)建管道時(shí),一般多以單一的SMCs復(fù)合血管支架構(gòu)建,但這種方法不能促進(jìn)TEBV移植后管壁內(nèi)新生毛細(xì)血管的生成,無(wú)法保證管壁內(nèi)種子細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)供給,不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖。上述兩方面的缺陷均會(huì)影響TEBV移植后的最終效果。本課題針對(duì)上述缺陷,通過(guò)改良傳統(tǒng)構(gòu)建技術(shù)來(lái)改善TEBV的構(gòu)建與移植效果。
　　研究方法：
　　實(shí)驗(yàn)一:利用種植

3、細(xì)胞片提高單層細(xì)胞在材料表面接種效率的實(shí)驗(yàn)研究
　　分離培養(yǎng)牛頸動(dòng)脈Ecs,制備脫細(xì)胞牛心包,通過(guò)“溫度應(yīng)答細(xì)胞片技術(shù)”,制備單層細(xì)胞片,分別采用種植細(xì)胞片與注射細(xì)胞懸液的方法在心包表面種植Ecs,并比較2種方法在細(xì)胞的接種數(shù)量、對(duì)細(xì)胞的代謝、破壞、分泌功能以及細(xì)胞在材料表面的分布等方面的優(yōu)劣。
　　實(shí)驗(yàn)二:利用內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)組織工程血管壁內(nèi)新生毛細(xì)血管生成的實(shí)驗(yàn)研究
　　分離培養(yǎng)人臍靜脈Ecs與人臍動(dòng)脈SMCs,制備脫

4、細(xì)胞豬小腸粘膜下層(small intestine submucosa,SIS),分別以Ecs與SMCs復(fù)合脫細(xì)胞SIS和單純SMCs復(fù)合脫細(xì)胞SIS的方法,構(gòu)建血管管道,并比較2種方法構(gòu)建的管道移植后在生成管壁內(nèi)毛細(xì)血管方面的優(yōu)劣。
　　研究結(jié)果：
　　實(shí)驗(yàn)一:種植細(xì)胞片的方法有利于提高細(xì)胞的接種數(shù)量,增強(qiáng)細(xì)胞的功能,改善細(xì)胞在材料表面的分布,同時(shí)不影響細(xì)胞的代謝,不增加細(xì)胞的破壞。
　　實(shí)驗(yàn)二:Ecs與SMCs復(fù)合