紅景天苷通過A2aR介導(dǎo)的線粒體凋亡抑制小鼠低氧性肺動脈高壓.pdf

1、目的:
　　1、研究紅景天苷(salidroside)對慢性低氧性肺動脈高壓小鼠肺動脈壓力的作用。
　　2、研究紅景天苷對A2aR(adenosine A2a receptor)和線粒體凋亡途徑的影響及其可能的調(diào)節(jié)機制。
　　方法:
　　將40只健康雄性的BALBc小鼠，隨機分成5組，每組8只，分別為N:正常對照組;H:低氧4周組;HS16:低氧4周+低劑量紅景天苷組(16mg/Kg); HS32:低氧4周+中劑

2、量紅景天苷組(32mg/Kg);HS64:低氧4周+高劑量紅景天苷組(64mg/Kg)。右心導(dǎo)管法測量右心室壓力(right ventricular systolicpressure，RVSP)，平均頸動脈壓力(mean carotid arterial pressure，mCAP)，右心室/體重(right ventricle/body weight，RV/BW)和右心室/（左心室+室間隔）(right ventricle/left

3、ventricle+septum，RV/(LV+S))，HE染色從而比較肺小血管的形態(tài)學(xué)變化，并測量管壁直徑/管總直徑(wall thickness/totalthickness，WT/TT)和管壁面積/管總面積(wall area/total area，WA/TA)，免疫組化染色計算肺動脈平滑肌細胞(pulmonary arterial smooth muscle cell，PASMCs)的密度從而反應(yīng)平滑肌細胞的增生程度，電鏡下進行

4、超微結(jié)構(gòu)觀察比較不同組別小鼠肺小動脈內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞的不同，TUNEL法(terminaldeoxynucleotidyl transferase-mediate dUTP nick,TUNEL)檢測PASMCs的凋亡程度，免疫熒光法測定肺小動脈管壁的平均吸光度值反應(yīng)線粒體途徑凋亡相關(guān)蛋白Bax和Bcl-2的相對表達量，用WB法檢測肺組織勻漿中A2aR蛋白和線粒體途徑相關(guān)凋亡蛋白細胞色素c(cytochrome C，Cytc)的相對

5、表達情況。
　　結(jié)果:
　　1、低氧組（H組）RVSP顯著高于正常對照組（N組）(p＜0.01)，紅景天苷組（HS16、HS32和HS64組）RVSP較低氧組（H組）下降（p均＜0.01），中劑量紅景天苷組（HS32組）下降最明顯，五組的mCAP無明顯差異(p＞0.05)。
　　2、低氧組（H組）RV/(LV+S)顯著高于正常組（N組）(p＜0.01)，紅景天苷組（HS16、HS32和HS64組）RV/(LV+S)較低

6、氧組（H組）下降（p均＜0.01），中劑量紅景天苷組（HS32組）下降最明顯。
　　3、低氧組（H組）RV/BW明顯高于正常組（N組）(p＜0.01)，低劑量紅景天苷組(HS16)和高劑量紅景天苷組(HS64)較低氧組的數(shù)值有下降趨勢，但并無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)，中劑量紅景天苷組(HS32)RV/BW較低氧組(H)明顯下降(p＜0.01)。
　　4、低氧組（H組）WT/TT和WA/TA顯著高于正常組（N組）(p＜0.0

7、1)，紅景天苷組（HS16、HS32和HS64組）明顯低于低氧組（H組）（p均＜0.01），中劑量紅景天苷組（HS32組）下降最明顯。低氧組肺動脈平滑肌密度高于正常組(p＜0.01)，紅景天苷組均顯著低于低氧組（p均＜0.01），中劑量紅景天苷組降低最明顯。
　　5、電鏡下，低氧組肺細小動脈內(nèi)皮細胞基底膜之間的連接破壞、疏松，平滑肌細胞線粒體代償性增生，甚至腫脹，空泡化，平滑肌細胞呈增生狀態(tài)。紅景天苷組肺小動脈內(nèi)皮及平滑肌細胞的上

8、述改變明顯減輕，趨向于正常。
　　6、低氧組（H組）AI顯著低于正常組（N組）(p＜0.01)，紅景天苷組(HS16、HS32和HS64組)較低氧組（H組）升高（p均＜0.01），中劑量紅景天苷組(HS32組)升高最明顯。
　　7、低氧組（H組）Bax蛋白熒光強度較正常組（N組）降低(p＜0.01)，紅景天苷組(HS16、HS32和HS64組)較低氧組有上升趨勢，中劑量組和高劑量組較低氧組有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.05)。低氧組

9、Bcl-2蛋白熒光強度較正常組升高(p＜0.01)，紅景天苷組（HS16、HS32和HS64組）較低氧組下降（p均＜0.01）。低氧組Bax/Bcl-2熒光強度相對值較正常組降低(p＜0.05)，紅景天苷組較低氧組上升(p＜0.05)，中劑量紅景天苷組上升最明顯(p＜0.05)。
　　8、低氧組肺組織勻漿A2aR蛋白較正常組表達增加(p＜0.05)，紅景天苷組較低氧組上升趨勢，但只有中劑量紅景天苷組較低氧組有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.0

10、1)。
　　9、低氧組肺組織勻漿線粒體內(nèi)Cytc較正常組增加(p＜0.01)，而紅景天苷組較低氧組表達有下降趨勢，中劑量和高劑量紅景天苷組較低氧組有統(tǒng)計學(xué)差異(p＜0.01)。而低氧組胞漿內(nèi)Cytc較正常組雖有下降趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)，中劑量和高劑量紅景天苷組較低氧組增加有顯著性差異(p＜0.01)。低氧組線粒體Cytc/胞漿Cytc相對值較正常組顯著提高(p＜0.01)，而紅景天苷組（HS16、HS32和HS64