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文檔簡介
1、目的:觀察煙酸姜黃素酯(CurTn)對HepG2細胞內(nèi)膽固醇代謝的影響。探究CurTn是否通過SREBP-2/LDLR通路,提高HepG2細胞內(nèi)膽固醇水平。
方法:體外用含10%FBS DEME培養(yǎng)HepG2細胞,采用MTT法檢測細胞活性,油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,酶法測定細胞內(nèi)膽固醇水平,qRT-PCR測定細胞內(nèi)SREBP-2、LDLR mRNA表達。
結(jié)果:MTT檢測發(fā)現(xiàn),與正常組相比,5μM、10μM、15
2、μM CurTn處理HepG2細胞24 h后,細胞活性無明顯變化;20μMCurTn顯著降低細胞活性(P<0.01)。與溶媒組相比,20μMCurTn也降低了細胞活性(P<0.05)。15μMCurTn及溶媒處理細胞36 h,與正常組相比,細胞活性明顯降低(P<0.01);因此,CurTn后續(xù)實驗作用濃度為5μM、10μM、15μM,最適作用時間為24 h。油紅O染色觀察顯示,與LDL組相比,5-15μM CurTn濃度依賴性地促進細胞
3、脂質(zhì)蓄積。酶法測定細胞內(nèi)膽固醇含量顯示,與LDL組相比,10μM和15μMCurTn顯著性增加細胞內(nèi)TC和FC的含量;15μMCurTn與煙酸組(300μM)相比,細胞內(nèi)TC和 FC含量明顯增加,與姜黃素組(25μM)比較,細胞內(nèi) TC含量明顯增加。qRT-PCR結(jié)果顯示,與空白對照組比較,LDL組SREBP-2、LDLR mRNA表達變化較??;與LDL組相比,溶媒組SREBP-2、LDLR mRNA的表達無顯著性變化;Cur組和煙酸組
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