骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合生物蛋白膠修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:建立組織工程方法修復(fù)家兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損的動(dòng)物模型,研究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)與生物蛋白膠(Bg)的混合物修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。
　　 方法:36只新西蘭大耳白兔隨機(jī)分成A、B、C3組,A組12只為單純?cè)炷＝M,B組12只為Bg修復(fù)組,C組12只為BMSCs復(fù)合Bg修復(fù)組。所有動(dòng)物雙側(cè)膝關(guān)節(jié)均參加實(shí)驗(yàn)。C組家兔于股骨中段穿刺抽取骨髓2-3ml,置于含10％胎牛血清(天津血液研究所)的DMEM(美國(guó)GIBCO)培養(yǎng)基中

2、,放入37度,5％CO2孵養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。上述原代培養(yǎng)BMCSs與生物蛋白膠制作成混合物,該混合物培養(yǎng)7-10天,取出待用。植入家兔股骨內(nèi)髁,所有家兔于股骨內(nèi)髁關(guān)節(jié)面行牙科鉆鉆孔,直徑3.5mm,深3.0mm,(至軟骨下骨,以出現(xiàn)點(diǎn)狀出血時(shí)止),制作成關(guān)節(jié)缺損動(dòng)物模型。A組不植入任何材料,為空白對(duì)照,B組植入Bg為Bg對(duì)照組,C組植入BMCSs與生物蛋白膠混合物為實(shí)驗(yàn)組。術(shù)后不固定,36只家兔分別于4、8、12、16周處死,取材進(jìn)行大體、組

3、織學(xué)觀察軟骨修復(fù)情況。參照Pineda標(biāo)準(zhǔn)對(duì)新生組織評(píng)分對(duì)比缺損修復(fù)的情況及新生組織的類型。
　　 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組4周即形成類透明軟骨組織,8周、12周組織學(xué)評(píng)分接近正常關(guān)節(jié)軟骨,16周修復(fù)軟骨仍未退變,而兩對(duì)照組形成纖維組織及纖維軟骨。組織學(xué)評(píng)分結(jié)果顯示各個(gè)時(shí)間段混合物實(shí)驗(yàn)組修復(fù)情況均優(yōu)于兩對(duì)照組,P<0.01,術(shù)后8周時(shí)Bg對(duì)照組的評(píng)分優(yōu)于空白對(duì)照組,P<0.05,術(shù)后12周時(shí)兩對(duì)照組組間評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P>0.05,各