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文檔簡介
1、目的:探討大黃素(emodin)衍生物E11對人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Molt-4及CA46的增殖、凋亡影響及其相應(yīng)的可能作用機制。
方法:采用MTT法繪制細(xì)胞生長曲線;集落培養(yǎng)法觀察大黃素衍生物E11對Molt-4、CA46克隆形成的影響;DAPI染色法熒光顯微鏡下觀察衍生物作用后的細(xì)胞形態(tài)變化;DNA片段化檢測大黃素衍生物E11誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用;蛋白印跡法(Western blot)檢測凋亡相關(guān)蛋白procaspase-9
2、、procaspase-3、PARP、及PI3K/AKT、MAPK通路蛋白表達(dá)的變化。
結(jié)果:1、大黃素衍生物E11對Molt-4、CA46細(xì)胞增殖具有明顯的抑制作用,48h的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為1.38±0.16μmol/L和1.18±0.15μmol/L,呈時間和濃度依賴性。
2、較低濃度E11即可抑制Molt-4、CA46細(xì)胞集落形成。
3、DAPI染色后在熒光顯微鏡下能看到衍生物組Molt
3、-4、CA46細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變。
4、DNA片段化可觀察到典型的DNA凋亡梯帶。
5、不同濃度大黃素衍生物E11作用Molt-4、CA46細(xì)胞48h,procaspase-9、procaspase-3、PARP、p-MAPK、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p-4BEP1、p-P70表達(dá)均下調(diào),MAPK、AKT、4EBP1、P70的表達(dá)變化不明顯。
1.2μmol/L的E11作用兩種細(xì)胞株不
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