CCN2-CCN3在腎小球硬化形成中作用機制的研究.pdf

1、背景:腎小球硬化是慢性腎臟病進展的重要機制，也是終末期腎衰形成的主要原因。本研究主要討論CCN家族成員CCN2(結(jié)締組織生長因子，CTGF)和CCN3（腎母細胞瘤過度表達基因，NOV）在腎小球硬化中的作用。目的:初步探討Anti-thy1.1腎炎模型中CCN2/CCN3表達的動態(tài)變化，及其在腎小球硬化形成中的作用;進一步檢測臨床非糖尿病CKD患者尿沉渣CCN2/CCN3mRNA的水平，并檢驗其在評估腎小球組織病理學改變中的價值。方法:采

2、用給大鼠注射OX-7抗體的方法，建立Anti-thy1.1腎炎模型，測定腎臟中CCN2和CCN3mRNA及蛋白表達的情況。培養(yǎng)游離的腎小球，并用CCN2siRNA、CCN3重組蛋白、Enalapril分別干預，觀察纖維化相關(guān)指標的改變。我們還收集了35例非糖尿病CKD患者（其中17例患者接受了腎活檢）和12例健康志愿者的尿液標本，測定尿沉渣CCN2和CCN3mRNA水平，并與臨床指標進行相關(guān)性分析。結(jié)果:造模4天后，與對照組相比，模型組

3、大鼠腎臟CCN2和CCN3mRNA及蛋白的水平有顯著增高。造模6天后升高的CCN3表達較4天組顯著下降，而CCN2的表達顯著增加（p值均＜0.05）。腎小球PAS染色評分結(jié)果，提示腎小球中CCN2持續(xù)升高，CCN3表達先升高后降低。在體研究顯示Enalapril治療顯著改善模型組大鼠腎小球CCN2/CCN3表達的改變，并伴隨著腎小球基質(zhì)擴張程度的減輕和蛋白尿水平的下降。體外研究顯示，采用能特異性抑制85％CCN2表達的siRNA或重組C

4、CN3蛋白干預培養(yǎng)的模型組腎小球可顯著降低PAI-1、TGF-β1、FNmRNA及TGF-β1、FN蛋白的表達（p值均＜0.05）。此外，加用重組CCN3蛋白或特異性siRNA能夠在單用最大劑量Enalapril治療的基礎(chǔ)上獲得“附加”的效應，進一步降低FN的表達。臨床非糖尿病CKD患者尿沉渣中CCN2和CCN3mRNA水平顯著高于健康對照組。尿沉渣CCN3mRNA水平與腎小球組織病理學改變呈負相關(guān)。此外，尿沉渣CCN2/CCN3mRN