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文檔簡介
1、本文主要從以下幾方面展開論述:
第一部分 谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)在大鼠線索依賴性條件恐懼記憶消散中的作用
目的:臨床研究在多種精神疾病如焦慮癥、驚恐癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙等患者體內(nèi)觀察到氧化應(yīng)激水平的升高。但氧化應(yīng)激在這些精神疾病中究竟扮演何種角色,目前尚無明確報(bào)道。谷胱甘肽(glutathione,GSH)氧化還原系統(tǒng)是體內(nèi)最重要的抗氧化系統(tǒng)之一,杏仁核依賴的線索依賴性條件恐懼記憶的形成和消散與多種精神行為密切相關(guān)。因此
2、,本文研究谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)在線索依賴性條件恐懼記憶消散中的作用。
方法:使用谷胱甘肽分析試劑盒,檢測恐懼消散訓(xùn)練后大鼠杏仁核組織中總谷胱甘肽(Total GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)比例;采用條件性恐懼記憶實(shí)驗(yàn),檢測谷胱甘肽耗竭劑丁硫氨酸-亞砜亞胺(L-buthionine-sulfoximine,BSO)和巰基還原劑二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)對大鼠
3、恐懼記憶消散的作用。
結(jié)果:恐懼訓(xùn)練后,大鼠杏仁核腦區(qū)游離型的To tal GSH含量顯著降低,而GSSG/Total GSH的比值顯著升高。消散的難易程度和杏仁核組織中GSSG/Total GSH的比值正相關(guān),GSSG/Total GSH越高,恐懼消散的難度越大。還原型谷胱甘肽耗竭劑BSO損傷大鼠線索依賴性條件恐懼記憶的消散。巰基還原劑DTT將GSSG還原成GSH,促進(jìn)大鼠線索依賴性條件恐懼記憶的消散。
結(jié)論:還原
4、型谷胱甘肽促進(jìn)大鼠線索依賴性條件恐懼記憶的消散。降低大鼠杏仁核谷胱甘肽水平損傷其線索依賴性條件恐懼記憶的消散,提高大鼠杏仁核還原型谷胱甘肽比例促進(jìn)其線索依賴性條件恐懼記憶的消散。
第二部分 谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)調(diào)節(jié)大鼠線索依賴性條件恐懼記憶消散的機(jī)制
目的:N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受體依賴的突觸可塑性是條件性恐懼記憶形成的細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ),在恐懼記憶的消散過程
5、中也扮演著重要角色。氧化還原狀態(tài)對NMDA受體的功能有著重要的調(diào)節(jié)作用。本部分實(shí)驗(yàn)研究谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)是否可能通過調(diào)節(jié)杏仁核腦區(qū)N MDA受體功能和突觸可塑性,參與調(diào)節(jié)大鼠恐懼記憶消散過程。
方法:采用場電位技術(shù)分別記錄:谷胱甘肽耗竭劑BSO,巰基還原劑DTT及巰基氧化劑5,5'二硫代雙(2-硝基苯甲酸)(5,5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid),DTNB)對大鼠腦片杏仁核區(qū)NMDA受體依賴
6、的突觸傳遞長時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP)的影響;采用腦片膜片鉗技術(shù)記錄DTT和DTNB對大鼠腦片杏仁核區(qū)NMDA受體興奮性突觸后電流(excitatory postsynaptic currents,EPSCs)的影響。
結(jié)果:谷胱甘肽耗竭劑BSO損傷杏仁核NMDA受體依賴的LTP;巰基還原劑DTT可顯著增強(qiáng)NMDA受體依賴的LTP,增加杏仁核NMDA受體介導(dǎo)的EPSCs的幅度,并可逆轉(zhuǎn)BS
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