毛冬青甲素對大鼠腦缺血再灌注后bFGF和GAP-43的表達及神經(jīng)元再生的影響.pdf

1、目的：探討毛冬青甲素(IlexoninA，IA)對大鼠腦缺血再灌注后bFGF和GAP-43的表達及神經(jīng)元再生的影響的可能作用機制。
　　 方法：線栓右側大腦中動脈阻塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)制成SD大鼠短暫局灶性腦缺血模型，實驗大鼠隨機分成：正常組、假手術組、模型組、毛冬青甲素治療組(分IA20、40mg/kg二個亞組)等4大組。采用Longa等評分法進行大鼠神經(jīng)功能評分；H

2、E染色觀察形態(tài)學變化；TTC染色法觀察腦缺血再灌注模型組和治療組缺血灶情況；免疫組織化學、蛋白免疫印跡法檢測缺血再灌注后不同時段各組缺血區(qū)周邊組織GAP-43、bFGF的表達情況；5-溴脫氧核苷尿嘧啶(Brdu)標記法檢測新增殖細胞數(shù)量，用Brdu/NeuN雙染法標記新生神經(jīng)元細胞，計算雙標細胞陽性率。并比較不同劑量(20、40mg/kg)的IA干預對大鼠神經(jīng)功能缺損評分，缺血區(qū)周邊組織GAP-43、bFGF和新生神經(jīng)元表達的影響。

3、r>　　 結果：腦缺血再灌注后3d，模型大鼠神經(jīng)功能缺損評分達到高峰(P＜0.05 VS14d、28d)；正常組及假手術組見散在的GAP-43陽性細胞(以皮層為主)，模型組GAP-43陽性細胞數(shù)量自再灌注7d后達到高峰，隨再灌注時間延長其表達逐漸減少，至再灌注14d與正常組及假手術組比較仍有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)；GAP-43蛋白于正常組及假手術組表達較少，模型組自再灌后第3d有一定量的表達，第7天表達最多，達到高峰，之后逐漸減少

4、，至28天仍有表達。同樣bFGF蛋白表達于再灌注后7d達到高峰，以后表達逐漸減少，與模型組其它時段比較P＜0.05。熒光雙標顯示假手術組見散在的新生神經(jīng)元細胞；模型組自再灌注后第3d有少量Brdu、Brdu/NeuN表達，至第7d達到高峰，以后逐漸減弱，至28d仍有表達，較3d組水平略高；正常組沒有Brdu、Brdu/NeuN表達。經(jīng)不同劑量組IA20、40mg/kg干預后，熒光雙標新生神經(jīng)元數(shù)量有不同程度的增加；大鼠神經(jīng)功能缺損評分有

5、明顯下降；缺血周邊區(qū)GAP-43、bFGF蛋白表達有明顯增多，與模型組相應時間點比較有顯著性差異(P＜0.05)。以40mg/kg作用為著。
　　 結論：
　　 1、腦缺血再灌注損傷可誘導GAP-43和內源性神經(jīng)營養(yǎng)因子bFGF的早期表達，并持續(xù)一段時間，我們推測GAP-43、bFGF的早期應激表達與及時挽救缺血周邊組織神經(jīng)元的存活及促進新生神經(jīng)元軸突再生和突觸重構，進而促進神經(jīng)功能恢復有關。
　　 2、毛冬青甲