16698.藍(lán)莓花青素、多酚類物質(zhì)的分離純化與生物活性研究

1、藍(lán)莓花青素、多酚類藍(lán)莓花青素、多酚類物質(zhì)的分離純化與物質(zhì)的分離純化與生物活性生物活性研究研究InvestigationonSeparationPurificationBiologicalActivityofAnthocyaninsPolyphenolsinBlueberry學(xué)科專業(yè)：食品科學(xué)研究生：李興元指導(dǎo)教師：寇曉虹副教授天津大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院二零一二年十一月摘要本文選擇藍(lán)莓中花青素和多酚類化合物兩類活性物質(zhì)進(jìn)行研究，以不同的提取工藝

2、對兩者進(jìn)行提取，采用AB8大孔吸附樹脂純化粗提物，共獲得藍(lán)莓花青素粗提物、多酚粗提物、花青素純化物和多酚純化物四種物質(zhì)。進(jìn)行了體外抗氧化、體外抗腫瘤、體內(nèi)抗腫瘤和免疫功能研究。通過總還原能力檢測（FRAP）、清除DPPH和ABTS自由基三種方法對四種提取物進(jìn)行了抗氧化性比較，發(fā)現(xiàn)純化后的花青素和多酚類物質(zhì)的抗氧化活性顯著提高（P0.05），同時在相同濃度下花青素抗氧化活性高于多酚類化合物。采用MTT法進(jìn)行體外抑制乳腺癌細(xì)胞（MDAMB2

3、31）增殖能力的分析，結(jié)果表明，四種提取物對MDAMB231細(xì)胞具有明顯的抑制作用，在實(shí)驗(yàn)選取濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系，花青素和多酚粗提物抑制腫瘤增殖能力較強(qiáng)（P0.05）。兩種純化物體外抑制腫瘤增殖的能力較低，這與體外抗氧化分析結(jié)果不同。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，以環(huán)磷酰胺為陽性對照，應(yīng)用四種提取物對乳腺癌CD1小鼠模型進(jìn)行抗腫瘤實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，三個劑量組的四種提取物對腫瘤抑制能力雖然低于環(huán)磷酰胺藥物組，但均具有一定程度的抑制作

4、用。同時顯著提高小鼠體重、胸腺和脾臟指數(shù)、巨噬細(xì)胞吞噬能力、脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化能力和體內(nèi)SOD活性（P0.05），減少肝組織MDA和血清NO的積累，其中多酚和花青素粗提物混合物效果最好，說明藍(lán)莓提取物在有效抑制腫瘤增長的同時能顯著提高小鼠的免疫功能和身體機(jī)能。應(yīng)用高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLCMS），對純化后藍(lán)莓花青素和多酚類化合物進(jìn)行物質(zhì)組成和結(jié)構(gòu)的分析，發(fā)現(xiàn)在花青素中主要含有天竺葵素3O半乳糖苷、槲皮素3O半乳糖苷和錦葵色素3O葡萄