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1、目的:(1)探討人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)對人卵巢癌細(xì)胞株3AO細(xì)胞體外增殖及凋亡的調(diào)控作用.(2)建立培養(yǎng)細(xì)胞的酶受體分析法(enzyme receptor assay,ERA),采用ERA研究3AO細(xì)胞LH/hCG受體特性.(3)研究hCG對3AO細(xì)胞內(nèi)3′,5′-環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine 3′,5′-monophosphate,cAMP)、鈣調(diào)蛋白(c
2、almodulin,CaM)含量及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性的影響.(4)初步分析了hCH對3AO細(xì)胞內(nèi)類胰島素生長因子-1(insulin-like growth factor-I,IGF-I)、凋亡基因bcl-2和bax在蛋白質(zhì)和mRNA水平表達(dá)的影響,探討hCG信號在癌細(xì)胞增殖凋亡中的作用機(jī)理.結(jié)論:(1)hCG對人卵巢癌細(xì)胞株3AO細(xì)胞的增殖具有明顯的促進(jìn)作用,并通過抑制順鉑介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡影響卵巢
3、癌細(xì)胞的藥物敏感性.(2)競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)、受體結(jié)合的特異性實(shí)驗(yàn)、飽和結(jié)合實(shí)驗(yàn)證明3AO細(xì)胞上存在特異性的LH/hCG受體.(3)3AO細(xì)胞LH/hCG受體主要激活腺苷酸環(huán)化酶(AC)/環(huán)磷酸腺苷(cAMP)系統(tǒng),而不能激活肌醇磷脂(PI)信號系統(tǒng).(4)hCG在體外促進(jìn)卵巢癌細(xì)胞生長增殖、抑制順鉑介導(dǎo)的3AO細(xì)胞的凋亡等作用可能與IGF-I的上調(diào)有關(guān),hCG不改變凋亡基因bcl-2和bax的表達(dá).該研究為揭示LH/hCG受體的異質(zhì)性與其特
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