豬流行性腹瀉病毒細(xì)胞感染受體的生物學(xué)特性鑒定.pdf

1、豬流行性腹瀉病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)可導(dǎo)致仔豬的嚴(yán)重腹瀉，尤其在東亞各國傳播非常廣泛，每年都造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。PEDV屬于Ⅰ群冠狀病毒，同屬于Ⅰ群冠狀病毒的豬流行性腹瀉病毒、人冠狀病毒229E、貓冠狀病毒都以氨基肽酶作為細(xì)胞感染受體。而且據(jù)國外的報(bào)道，豬氨基肽酶(porcine aminopeptidase，pAPN)可以與PEDV病毒發(fā)生特異性結(jié)合，并且這種結(jié)合可以被抗pAPN

2、的抗體抑制，但其是否就是PEDV的受體并沒有定論。為了研究pAPN是否為PEDV的細(xì)胞感染受體，通過轉(zhuǎn)染MDCK這種對PEDV是非許可性的細(xì)胞使其表達(dá)pAPN，并且用PEDV對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行感染，我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染可以使PEDV感染MDCK細(xì)胞而且病毒可以在這種細(xì)胞上連續(xù)傳代。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證實(shí)了抗pAPN的血清可以抑制PEDV對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞的感染。而且通過western-blotting及免疫熒光實(shí)驗(yàn)確定了pAPN的表達(dá)，并用免疫熒光及用獲