SYT-SSX對滑膜肉瘤的診斷和預(yù)后意義及其在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用.pdf

1、滑膜肉瘤的診斷和鑒別診斷一直是病理外檢工作中的一個(gè)難點(diǎn)。其預(yù)后因素的文獻(xiàn)報(bào)道經(jīng)常是矛盾的。染色體易位t(X；18)(p11.2；q11.2)及其導(dǎo)致的SYT-SSX 基因融合是滑膜肉瘤的分子遺傳學(xué)特征，可能在滑膜肉瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。檢測SYT-SSX有助于滑膜肉瘤的診斷和判斷預(yù)后。研究目的評價(jià)SYT-SSX 分子遺傳學(xué)檢測在診斷滑膜肉瘤中的價(jià)值與適用情況，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。分析SYT-SSX亞型及一些臨床病理參數(shù)在滑膜

2、肉瘤中的預(yù)后意義，尋找能夠提示患者預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療的因素。并且，初步研究SYT-SSX 在滑膜肉瘤上皮分化、腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡中的作用，為闡述滑膜肉瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 研究方法 1、(1)收集可能為滑膜肉瘤的病例195例，根據(jù)臨床表現(xiàn)、組織學(xué)形態(tài)和免疫組化結(jié)果進(jìn)行傳統(tǒng)診斷和分類。(2)制作組織微陣列，并在組織芯片上進(jìn)行FISH，檢測SYT-SSX融合基因。(3)從石蠟包埋組織中提取RNA，進(jìn)行RT-PCR，

3、檢測SYT-SSX mRNA 表達(dá)。(4) 比較傳統(tǒng)診斷與分子遺傳學(xué)診斷的結(jié)果。 2、(1)RT-PCR檢測SYT-SSX1 和SYT-SSX2 的 mRNA 表達(dá)。(2)進(jìn)行上皮性鈣粘素、α-連接素、β-連接素、γ-連接素、Ki-67、Bcl-2與Bax的免疫組化染色。(3)采用TUNEL技術(shù)檢測凋亡情況。(4)分析SYT-SSX 亞型與滑膜肉瘤組織學(xué)類型、上皮標(biāo)記物、上皮性鈣粘素及連接素表達(dá)之間的關(guān)系，與Ki-67 標(biāo)記指數(shù)

4、、凋亡指數(shù)及凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)之間的關(guān)系。 3、(1)采用壽命表法計(jì)算滑膜肉瘤患者的生存率。(2)使用單因素和多因素分析方法，研究SYT-SSX亞型及一些臨床病理參數(shù)與患者總體生存、無復(fù)發(fā)生存和無轉(zhuǎn)移生存之間的關(guān)系。 研究結(jié)果 1、(1)根據(jù)臨床表現(xiàn)、組織學(xué)形態(tài)和免疫組化結(jié)果，確診、高度可疑和可疑滑膜肉瘤分別為62(31.8％)、49(25.1％)和84(43.1％)例。(2)168例(86.2％)能夠進(jìn)行FISH

5、分析，138例(70.8％)為SYT-SSX陽性。(3)179例(91.8％)能夠進(jìn)行RT-PCR檢測，140例(78.2％)可檢出SYT-SSX mRNA表達(dá)。(4)164例(84.1％)的FISH或RT-PCR結(jié)果為陽性，兩種分子遺傳學(xué)方法的結(jié)果符合率為84.8％。(5) 91.9％的確診滑膜肉瘤、85.7％的高度可疑滑膜肉瘤與77.4％的可疑滑膜肉瘤呈SYT-SSX陽性。 2、(1)145例 SYT-SSX 陽性的滑膜肉瘤

6、中，50例(34.5％)SYT-SSX1 陽性，91例(62.8％)SYT-SSX2 陽性，并且沒有1例呈現(xiàn)SYT-SSXl和SYT-SSX2共同陽性。(2)SYT-SSX1 型滑膜肉瘤中雙相型的比例(P<0.001)、CK(P=0.012)、EMA(P=0.047)、上皮性鈣粘素(P<0.001)和α-、β-、γ-連接素(均P<0.001)的陽性率均顯著高于SYT-SSX2 型腫瘤。(3)SYT-SSX1和SYT-SSX2型滑膜肉瘤中

7、的核分裂數(shù)分別為15.58±9.18和11.02±8.78，Ki-67 標(biāo)記指數(shù)分別為25.26％±12.78％和19.77％±11.44％，SYT-SSX1型均明顯高于SYT-SSX2型(分別P=0.004，P=0.010)。(4)SYT-SSXl與SYT-SSX2型腫瘤的凋亡指數(shù)分別為1.66％±1.84％和1.65％±2.22％，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。并且，Bcl-2和Bax在不同融合基因亞型中的表達(dá)情況無明顯差別。 3、(1)1

8、41例滑膜肉瘤患者的第1、3、5和10年總體生存率分別為88.01％、75.11％、57.82％和27.72％。第1、3、5和10年累積復(fù)發(fā)率分別為19.77％、40.39％、50.68％和70.10％。第1、3、5和10年累積轉(zhuǎn)移率分別為12.69％、23.51％、37.20％和55.43％。(2)腫瘤直徑≥5cm、組織學(xué)分級Ⅲ級、SYT-SSX1 型和出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的患者總體生存不良。(3) 腫瘤直徑≥5cm、組織學(xué)分級Ⅲ級的患者的無復(fù)發(fā)

9、生存不佳。(4)腫瘤發(fā)生于四肢以外的部位、組織學(xué)分級Ⅲ級和SYT-SSX1型患者的無轉(zhuǎn)移生存較差。 結(jié)論 1、(1)使用FISH技術(shù)檢測SYT-SSX融合基因，利用石蠟包埋組織中提取的RNA進(jìn)行RT-PCR檢測SYT-SSX mRNA 表達(dá)可以輔助診斷滑膜肉瘤。(2)但是，SYT-SSX 的分子遺傳學(xué)檢測對于滑膜肉瘤的診斷不是必須的，主要用于傳統(tǒng)診斷方法難于確定的病例的診斷。 2、(1)SYT-SSX1與SYT-

10、SSX2 是互相排斥的，它們的分布比例可能存在地域和人種差異，我國患者可能以SYT-SSX2 型為主。(2)SYT-SSX1 允許或促進(jìn)滑膜肉瘤腫瘤細(xì)胞向上皮方向分化的能力強(qiáng)于SYT-SSX2。它們可能通過調(diào)節(jié)下游基因的表達(dá)從而影響腫瘤細(xì)胞的分化。(3)另外，SYT-SSX1與SYT-SSX2具有不同的調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞增殖的能力，但對細(xì)胞凋亡的影響無明顯差別。 3、(1)腫瘤最大直徑、組織學(xué)分級、SYT-SSX亞型和轉(zhuǎn)移是提示滑膜肉