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1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文地塞米松對(duì)嘌呤霉素?fù)p傷小鼠腎小球足細(xì)胞系保護(hù)作用的分子機(jī)制研究姓名:溫躍強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):兒科學(xué)指導(dǎo)教師:于力20090520廣州醫(yī)學(xué)院碩十學(xué)位論文地塞米松對(duì)嘌呤霉索損傷小鼠腎小球足細(xì)胞系保護(hù)作用的分子機(jī)制研究ABSTRACTObjectireInordertodemonstratethepossibleanti—proteinuriamechanismsofdexamethasone,astudywasd
2、esignedtoexplorethepodocyteapoptosisrateandexpressionanddistributionofpodocinandCD2APinatimeseriesscaleinthecaseofpodocyteinjuryandprotectioninvitroMethodsMousepodocytecellline(MPC5)wereculturedin002%DMSOincontrolgroup,s
3、ubjectedtopuromycinaminonucleoside(PAN)treatmentaloneorwithdexamethasone(DEX)inothertwogroupsThepodocytemorph0109ywasobservedandtookpicturesbyphase~contrastmicroscope,thenthedifferencesofmorphologyandareasbetweeneachgrou
4、pswereanalyzedbyImageJTheapoptosiSratewasdetectedbyflowcytometry,thedistribution,mRNAexpressionandproteinexpressionlevelofpodocinandCD2APweredetectedbyindirectimmunocyto—fluorescence,semi—quantitativeRT—PCRandWesternblot
5、,respectivelyResults(1)Thewel1一developedpodocytearborizationandinterconnectionwasformedincontrolgroup,butPANtreatmentledtosignificantshrinkageofpodocytes(PO01),togetherwithpodocytefootprocesseretraction,effacementandloss
6、ofcellcontactTheapoptosiSratewasincreasedat48h(PO05)RT—PCRfoundpodocinandCD2APmRNAexpressionpronetodecrease,WesternblotshowedpodocinproteinexpressionsignificantdecreaseandimmunocytochemistrysuggestedpodocinandCD2APdisapp
7、earedinthecellularmembraneafterPANtreatment(2)DEXsignificantlypreventedtheshrinkageandapoptosisofpodcyte,increasedpodocinandCD2APmRNAexpression,andincreasedpodocinproteinexpressionlevelat48h(P005)Theabnormaldistriutionof
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