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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察足細(xì)胞Tbxa2r基因敲低對(duì)嘌呤霉素氨基核苷誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡的影響。
方法:
通過目標(biāo)序列的設(shè)計(jì)以及細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率評(píng)價(jià)后,RT-PCR檢測(cè)干擾效果,Westernblot法檢測(cè)Tbxa2r蛋白表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)嘌呤霉素氨基核苷誘導(dǎo)的MPC5細(xì)胞的凋亡情況。
結(jié)果:
1.正常足細(xì)胞培養(yǎng)48h后,用嘌呤霉素氨基核苷刺激48h,細(xì)胞沒有明顯的凋亡現(xiàn)象。
2、 2.陰性對(duì)照組(加無關(guān)siRNA片段),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,結(jié)果也和正常細(xì)胞相仿。
3.陽(yáng)性對(duì)照組(GAPDH干擾質(zhì)粒),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡細(xì)胞明顯增加,壞死細(xì)胞也大大增加。
4.有效干擾片段組(Tbxa2r-mus-1677),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡和壞死的細(xì)胞和陽(yáng)性對(duì)照組相似。
結(jié)論:
嘌呤霉素氨基核苷能促進(jìn)Tbxa2r基因敲低的足細(xì)胞發(fā)生凋亡和壞死。
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