氧化應(yīng)激在糖尿病腎病鼠腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中的作用及普羅布考干預(yù)研究.pdf

1、背景：糖尿病腎病是糖尿病重要的微血管并發(fā)癥，是導(dǎo)致終末期腎病最主要的原因，目前研究表明氧化應(yīng)激和腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及核轉(zhuǎn)錄因子Sp1在其發(fā)病機制中占有重要地位，但氧化應(yīng)激和轉(zhuǎn)分化及核轉(zhuǎn)錄因子Sp1在糖尿病腎病中的相互作用機制仍不清楚。 目的：研究糖尿病大鼠氧化應(yīng)激與腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及核轉(zhuǎn)錄因子Sp1之間的關(guān)系；探討普羅布考對糖尿病大鼠腎臟保護作用的機制。 方法：30只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組（CN），糖尿病腎

2、病模型組（DN）和普羅布考+DN干預(yù)組（PN），每組10只，糖尿病成模次日，普羅布考組大鼠予1％普羅布考飲食干預(yù)12周；3周后檢測各組大鼠尿蛋白（UAlb），24小時UAlb>30mg，DN模型成立。第8周及第12周分別收集24h尿液，檢測尿24小時UAlb，12周后處死大鼠，檢測大鼠血清生化及腎臟組織勻漿氧化應(yīng)激指標(biāo)；觀察大鼠腎臟組織病理學(xué)變化及免疫組化檢測特異性蛋白1（Sp1）、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）及E-鈣黏蛋白（E-c

3、adherin）蛋白表達(dá)；Westernblot檢測腎組織α-SMA及E-cadherin蛋白表達(dá)。 結(jié)果：與對照組比較，DN組血糖、SCr和Ualb顯著增高（P<0.01），CCr顯著降低（P<0.01）；腎組織勻漿MDA明顯高于CN組及PN組（P<0.001）；腎臟病理學(xué)顯示腎組織腎小管損傷分?jǐn)?shù)、明顯高于PN組及CN組（P<0.001）；腎組織α-SMA主要表達(dá)于動脈壁及腎小管上皮細(xì)胞胞膜和胞漿，E-cadherin表達(dá)于腎

4、小管上皮細(xì)胞胞膜和胞漿，Sp1主要表達(dá)于腎小球系膜細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞核。DN組α-SMA和Sp1蛋白表達(dá)明顯高于PN組及CN組（P<0.001），E-cadherin蛋白表達(dá)明顯低于PN組及CN組，各組大鼠腎組織MDA含量與α-SMA及Sp1蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（γ=0.862，P<0.001；γ=0.896，P<0.001），與E-cadherin蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（γ=-0.673，P<0.001）。普羅布考預(yù)防組SCr、Ualb、腎組

5、織MDA、腎小管損傷分?jǐn)?shù)、腎組織α-SMA、 Sp1蛋白表達(dá)較DN組明顯降低，CCr及E-cadherin蛋白表達(dá)較DN組明顯增加（P<0.001），且與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：STZ誘導(dǎo)的糖尿病腎病大鼠腎組織氧化應(yīng)激水平增高；氧化應(yīng)激在DN鼠腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的早期起重要作用；Sp1在氧化應(yīng)激介導(dǎo)的DN鼠腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化中可能起一定作用；普羅布考對糖尿病腎病起一定的保護作用，其機制可能與其抗氧化，抑制腎組織S