先天性膽總管囊腫腸神經(jīng)分布及發(fā)病機制研究.pdf

1、目的：通過檢測對比先天性膽總管囊腫（Congenital choledochal cyst，CCC）不同部位囊壁組織與計劃外懷孕中晚期終止妊娠胎兒膽管壁組織的神經(jīng)生長因子（Nervous growth factor，NGF）及其受體（高親和力受體TrkA和低親和力受體P75NGFR）表達、神經(jīng)細(xì)胞特異性烯醇化酶（Neurocyte specifice enolase，NSE）與蛋白基因產(chǎn)物S-100（Soluble protein100

2、，S-100）的表達，從膽管壁腸神經(jīng)的發(fā)育與分布角度探討其在CCC發(fā)病機制中的作用，豐富和完善CCC的發(fā)病機理；同時NSE與S-100的測定具有協(xié)同互補作用，可作為判斷膽道神經(jīng)發(fā)育狀況的良好標(biāo)記物。
　　 方法：隨機選取2007年1月～2009年1月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院小兒外科收治的先天性膽總管囊腫患兒22例作為研究對象，男4例，女18例；年齡4.44±3.90歲（1個月～18歲）。其中以腹痛就診者14例，以黃染白便就診者6例，

3、以發(fā)熱嘔吐就診者1例，B超常規(guī)普查時發(fā)現(xiàn)1例。所有患兒術(shù)前均經(jīng)B超或CT明確診斷，手術(shù)切除膽總管囊腫和膽囊，行肝門空腸Roux-Y吻合術(shù)，分別切取膽總管囊腫遠(yuǎn)端、近端的囊壁和膽囊壁作為實驗組。選取計劃外懷孕中晚期終止妊娠的胎兒11例，其中男5例，女6例，孕齡7.36±0.81月（6～8個月）。切取胎兒的膽囊壁和膽總管壁作為對照組。將兩組所得標(biāo)本分別以10％多聚甲醛固定、石蠟包埋，采用S-P法作石蠟切片免疫組化染色。ABC顯色，細(xì)胞質(zhì)中呈

4、現(xiàn)棕黃色者為陽性，藍色者為陰性，采用光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果。多功能真彩色細(xì)胞圖像分析管理系統(tǒng)分析處理，將陽性細(xì)胞數(shù)的表達按照0～1％=0、2～10％=1、11～50％=2、51～80％=3、81～100％=4分為五級（A）；陽性細(xì)胞顯色強度按照0（陰性）、1（弱陽性）、2（陽性）、3（強陽性）分為四級（B）。計算每五個視野下的陽性細(xì)胞個數(shù)（IHS=AxB）。對比分析CCC患兒膽囊、膽總管囊壁不同部位和胎兒的膽囊和膽管壁之間的腸神經(jīng)發(fā)育各指標(biāo)

5、的表達情況。所得數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0 for Windows軟件進行數(shù)據(jù)分析，采用單因素的方差分析進行統(tǒng)計學(xué)處理。
　　 結(jié)果：光鏡下觀察NGF及其受體（TrkA和p75SGFR）、NSE和S-100的分布情況，發(fā)現(xiàn)所有上述指標(biāo)在實驗組和對照組的標(biāo)本中均在胞質(zhì)中有不同程度的表達。其中NGF、TrkA、p75NOFR和NSE在先天性膽總管囊腫遠(yuǎn)端的表達分別為0.73±0.15，0.82±0.13，0.91±0.13和0.73±

6、0.12；在囊腫近端表達分別為1.50±0.18，2.14±0.34，1.50±0.25和1.50±0.25；在胎兒膽總管的表達分別為2.64±0.49，3.82±0.50.2.27±0.52和2.36±0.56。可以看出上述因子在先天性膽總管囊腫遠(yuǎn)端的表達弱于在囊腫近端的表達（P<0.05），有顯著性差異。而在先天性膽總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端的表達又均弱于在胎兒期膽總管的表達，三者之間有明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）；S-100在先天性膽

7、總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端和胎兒期膽總管表達分別為1.00±0.11，1.59±0.20和2.73±0.38。S-100在先天性膽總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端的表達也均弱于在胎兒期膽總管的表達（P<0.05），有統(tǒng)計學(xué)差異，但是在先天性膽總管囊腫遠(yuǎn)端和近端的表達沒有差別（P>0.05），無統(tǒng)計學(xué)差異。上述指標(biāo)在實驗組和對照組膽囊標(biāo)本的表達無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.依據(jù)NGF、TrkA、p75NGFR在

8、CCC的遠(yuǎn)端及近端表達均弱于在胎兒膽總管的表達，認(rèn)為神經(jīng)生長因子及其受體在CCC的發(fā)病中起到重要作用，腸神經(jīng)發(fā)育不良可能是其發(fā)病的重要原因之一。
　　 2.NGF、TrkA、p75NGFR在CCC遠(yuǎn)端的表達弱于囊腫近端的表達，說明囊腫遠(yuǎn)端是病變之所在，上述指標(biāo)在囊腫遠(yuǎn)端的發(fā)育受限，進一步導(dǎo)致膽總管的擴張。
　　 3.NGF、TrkA、p75NGFR在CCC近端的表達弱于在胎兒膽總管的表達，推測可能是由于膽總管的擴張，導(dǎo)致