Cajal間質細胞、神經突觸素在先天性膽總管囊腫的表達及意義.pdf

1、目的：通過對比分析先天性膽總管囊腫（Congenital choledochal cyst，CCC）不同部位膽道組織與中晚期終止妊娠胎兒膽道組織中Cajal間質細胞（interstitial cells of Caial，ICC），的分布和突觸素（synaptophysin，SY）的表達，從膽道動力和神經傳導角度分析膽道腸神經發(fā)育在先天性膽總管囊腫發(fā)病機制中的作用，豐富和完善CCC的發(fā)病機理。
　　 方法：隨機選取2007年1月

2、～2009年1月河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院小兒外科收治的先天性膽總管囊腫患兒22例作為實驗組。男4例，女18例，平均年齡4.44±3.90歲（1月～18歲）。其中以腹痛就診者14例，以黃染白便就診者6例，以發(fā)熱嘔吐就診者1例，B超常規(guī)查體時發(fā)現1例。所有患兒均于術前經B超或CT明確診斷后手術切除膽總管囊腫和膽囊，行膽腸吻合術，分別切取膽總管囊腫近端、遠端的囊壁和膽囊壁做為實驗組標本。另選取計劃外懷孕中晚期終止妊娠的胎兒11例做為對照組，男5例

3、，女6例，月齡7.36±0.81月（6～8個月）。切取胎兒的膽囊和膽總管做為對照組標本。將兩組所得標本分別以10％中性甲醛固定、石蠟包埋制成蠟塊，石蠟切片采用S-P法免疫組化染色，DAB顯色，蘇木素復染。采用中高倍光學顯微鏡觀察石蠟切片，了解CCC患兒膽道組織ICC發(fā)育、分布及SY表達情況：分別在CCC患兒膽囊、膽總管囊腫壁遠端和近端、胎兒膽囊以及膽總管免疫組化染色切片中采用多功能真彩色細胞圖像分析管理系統(tǒng)每張切片隨機選取5個視野，計算

4、各部位陽性ICC細胞數和測量突觸素陽性表達區(qū)域的面積，每次計算5個視野陽性總數。將兩者所得數據均分別以x士s表示。分別對CCC患兒膽道各部位之間、CCC患兒和胎兒膽道各部位之間：ICC和SY的表達進行對比分析，所得數據輸入SPSS13.0軟件，采用Independent-Sample t test進行統(tǒng)計學處理。
　　 結果：光鏡下在胎兒膽總管免疫組化染色切片觀察，可見陽性表達ICC呈紡錘狀或梭形，細胞核大，呈梭形或卵圓形，核周

5、胞漿少，常有2個或2個以上的細長突起，依靠突起細胞間彼此相互連接形成網絡狀分布，而在CCC囊壁則分布稀疏，遠端明顯減少甚至缺失。同樣在胎兒膽總管可見SY在神經叢與平滑肌接頭處呈棕黃色的陽性表達，而在CCC囊壁近端表達相對較弱、遠端狹窄段不明顯。膽總管囊腫遠端囊壁ICC計數6.55±1.85個，囊壁近端8.59±3.05個，膽囊9.59±3.40個；胎兒膽總管ICC記數11.82±2.64個，膽囊9.91±5.68個。膽總管囊腫遠端囊壁S

6、Y著色面積為97.37±29.72μ㎡，近端囊壁123.73±51.32μ㎡，膽囊217.16±56.37μ㎡；而胎兒膽總管SY陽性表達面積為229.66±69.35μ㎡，膽囊178.36±39.12μ㎡。CCC囊壁各部位之間、以及與胎兒膽道各部位之間ICC和SY的表達對比結果為：①ICC在CCC遠、近端囊壁分布比較有明顯差異（t=2.69，P=0.010）；②ICC在CCC囊壁遠端分布明顯少于胎兒膽總管的分布（t=6.69，P=0.0

7、01）；③ICC在CCC囊壁近端分布亦弱于胎兒膽總管的分布（t=2.99，P=0.005）；④ICC在CCC和胎兒兩組膽囊標本中表達無明顯差異（t=1.19，P=0.243）⑤SY在CCC囊壁遠端的表達明顯弱于近端的表達（t=2.78，P=0.012）；⑥SY在CCC遠端囊壁的表達與胎兒膽總管的表達相比有更顯著性差異（t=3.65，P=0.004）；⑦SY在CCC近端囊壁的表達亦弱于在胎兒膽總管的表達（t=2.99，P=0.048）；⑧

8、SY在CCC和胎兒兩組膽囊標本中表達無明顯差異（t=2.49，P=0.078）。
　　 結論：
　　 1.正常胎兒晚期膽總管和膽囊的ICC分布和SY表達已發(fā)育完善。
　　 2.ICC和SY在膽總管囊腫的分布和表達均弱于正常胎兒，特別是在CCC囊壁的遠端出現ICC明顯減少或缺失以及SY的表達顯著減低，說明CCC在胚胎期已因各種原因導致了膽道ICC和SY的發(fā)育不良，尤其在膽總管遠端的發(fā)育缺陷影響了膽總管遠端神經一肌肉