TuMV及其與CMV的嵌合片段對菜心和甘藍(lán)的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、十字花科包括白菜類、甘藍(lán)類、芥菜類、蘿卜類等重要的蔬菜作物。病毒病是危害十字花科蔬菜的主要病害之一。目前，人們主要通過常規(guī)育種，從優(yōu)質(zhì)的種質(zhì)資源中導(dǎo)入抗性基因/簇，提高作物對病毒病的抗性。但傳統(tǒng)育種由于育種周期長、抗性基因常與不良性狀連鎖、優(yōu)良種質(zhì)資源的匱乏，以及物種間生殖隔離等因素的限制，阻礙了育種進(jìn)程的快速發(fā)展。因此，利用基因工程創(chuàng)造新的抗病毒種質(zhì)資源為當(dāng)今抗性育種的一條重要補充途徑。 本研究主要利用RNA干涉的原理，試圖通

2、過基因工程的手段得到能抗蕪菁花葉病毒(TuMV)的菜心資源，以及同時抗蕪菁花葉病毒和黃瓜花葉病毒(CMV)的甘藍(lán)種質(zhì)資源。 利用蕪菁花葉病毒CP基因構(gòu)建成反向重復(fù)表達(dá)載體，再利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將其導(dǎo)入四九菜心，共獲得13個PCR陽性轉(zhuǎn)化株，遺傳轉(zhuǎn)化效率為2.2﹪。 為了得到對蕪菁花葉病毒和黃瓜花葉病毒雙抗的甘藍(lán)資源，首先進(jìn)行了甘藍(lán)再生體系的優(yōu)化。對甘藍(lán)下胚軸外植體的高效再生體系的優(yōu)化結(jié)果表明，當(dāng)選取5d苗齡的下胚軸，將其置