白藜蘆醇對人體P450酶活性影響及與降壓藥物相互作用的研究.pdf

1、白藜蘆醇是紅酒能抗動脈粥樣硬化癥和冠心病的重要成分。近年來的研究證實，白藜蘆醇可通過激活SIRT-1下調(diào)P53蛋白的表達抑制細胞凋亡;并上調(diào)過氧化物酶體增殖物受體γ共激活因子1α(PGC-1a)增加線粒體合成，減少葡萄糖吸收，增加基礎(chǔ)代謝率并改善線粒體功能。因此，白藜蘆醇能有效改善代謝綜合征、心血管疾病、線粒體功能紊亂和神經(jīng)系統(tǒng)疾病[4]。臨床上逐漸開始利用白藜蘆醇來預(yù)防和緩解心血管疾病，美國已把白藜蘆醇作為膳食補充劑，日本也將白藜蘆醇

2、作為食品添加劑，在中國添加白藜蘆醇的保健品也逐漸上市。
　　心血管疾病發(fā)病率日趨升高，白藜蘆醇在心血管保護和疾病的預(yù)防、緩解方面的應(yīng)用越來越廣泛，然而基礎(chǔ)實驗結(jié)果提示，白藜蘆醇可在老鼠體內(nèi)及cDNA等層面改變CYP1A2、CYP3A家族的酶活性，因此明確白藜蘆醇對細胞色素酶的影響對兩藥聯(lián)用時心血管藥物的藥動學(xué)和藥效學(xué)的相互作用愈發(fā)重要。細胞色素酶P450系是存在于肝臟微粒體的混合功能酶系，絕大多數(shù)藥物都要經(jīng)過其代謝。當細胞色素酶P

3、450酶系統(tǒng)CYP與各種外源性物質(zhì)接觸時易發(fā)生誘導(dǎo)或抑制反應(yīng)，細胞色素酶P450活性的改變，引起體內(nèi)藥物藥代動力學(xué)的改變，從而導(dǎo)致藥效的變化[5]，研究藥物對P450酶系活性的誘導(dǎo)和抑制作用，對于臨床用藥有著重大的意義。因此揭示白藜蘆醇常見的細胞色素酶家族的作用，對于白藜蘆醇和其他藥物聯(lián)用的影響有著重要意義。本研究提出的核心假說:白藜蘆醇可改變?nèi)思毎孛窹450酶CYP1A2、CYP3A4的活性。
　　高血壓是導(dǎo)致心血管疾病死亡

4、率的主要原因，它是心血管疾病主要危險因素，也是慢性腎病的起因之一。高血壓病人在服用各類降壓藥物的同時，可同時聯(lián)用白藜蘆醇改善血管狀況，延緩高血壓疾病進程。而白藜蘆醇對代謝降壓藥物的P450酶活性有影響，導(dǎo)致兩藥聯(lián)用時其改變降壓藥物代謝，進而導(dǎo)致療效及副作用的改變。明確白藜蘆醇與降壓藥物聯(lián)用時降壓藥物藥動學(xué)的變化，對于兩藥聯(lián)用的安全性和有效性有著重大意義。常見的降壓藥物包括氯沙坦和氨氯地平。氯沙坦是一類血管緊張素Ⅱ受體抑制劑，由CYP2D

5、6酶系特異性代謝;氨氯地平是高血壓患者常用的藥物之一，為長效二氫毗啶類鈣拮抗劑，主要由CYP3A代謝[6，7]，當CYP2D6酶活性或CYP3A酶活性改變時，可引起氯沙坦或氨氯地平藥動學(xué)的改變，進而影響其藥物療效甚至可能引起嚴重的副作用。因此，明確白藜蘆醇對相關(guān)常用的降壓藥物代謝的影響，可為高血壓患者同時服用白藜蘆醇及降壓藥物時增加藥物療效減小副作用提供依據(jù)。
　　研究目的:
　　1.通過模型預(yù)測白藜蘆醇對人細胞色素酶P45

6、0各主要亞型活性影響的概率;
　　2.明確白藜蘆醇對人細胞色素酶P450各亞型CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4活性的影響;
　　3.探討白藜蘆醇對降壓藥物氨氯地平和氯沙坦代謝的影響。
　　研究方法:
　　1.利用ADMET數(shù)據(jù)庫搜集所有關(guān)于化合物與細胞色素酶P450各亞型酶活性影響的研究，分別建立基于化合物SMILES式的各亞型活性相關(guān)預(yù)測模型;將白藜蘆醇的SMILES式輸入

7、各模型后，預(yù)測白藜蘆醇對各亞型酶活性影響的概率;
　　2.采用“cocktail”法，將26名年齡在18-30歲之間健康男性受試者隨機分為試驗組和安慰劑組，連續(xù)服用白藜蘆醇或安慰劑1g，連續(xù)14天，通過比較兩組血藥濃度改變和藥物代謝率，根據(jù)其統(tǒng)計學(xué)指標的差異來判斷細胞色素酶亞型活性的改變;
　　3.在上組試驗的基礎(chǔ)上，在受試者連續(xù)服用白藜蘆醇第八天早上服用白藜蘆醇后采其血樣并檢測血液中白藜蘆醇濃度，明確白藜蘆醇達到穩(wěn)態(tài)后在體

8、內(nèi)的藥動學(xué)情況;
　　4.采用自身對照的研究方法，入選健康受試者13名，在試驗前服用5mg氨氯地平，經(jīng)過五天洗脫期后連續(xù)服用白藜蘆醇1g/天，14天后再次服用氨氯地平5mg，比較前后兩次氨氯地平藥動學(xué)參數(shù)，明確白藜蘆醇對氨氯地平藥物代謝的影響;利用第二章的數(shù)據(jù)進一步分析白藜蘆醇對氯沙坦代謝的影響。
　　研究結(jié)果:
　　1.預(yù)測模型結(jié)果提示，白藜蘆醇對CYP1A2有影響的概率，最大為91.06％;對CYP2C19有影響的

9、概率為80.52％;對CYP3A4和CYP2C9有影響的概率較小(75.39％、70.68％);對CYP2D6沒有影響，概率為92.26％;
　　2.白藜蘆醇組CYP1A2的探針藥物咖啡因AUC0-12; AUC0-∞;Cmax分別增加32.10％(P＜0.001)、71.52％(P＜0.001)、20.62％(P=0.004)，T1/2顯著增加(P=0.002);與對照組相比，受試者尿液中CYP2C9探針藥物右美沙芬與其代謝產(chǎn)物

10、去甲右美沙芬比率(DTM/DT)的比率增加了79.91％(P=0.003)，CYP2D6探針藥物氯沙坦與其代謝產(chǎn)物E-3174的比率（losartan/E-3174）增加了531.34％(P＜0.001); CYP2C19和CYP3A4的探針藥物奧美拉唑和咪達唑侖的藥動學(xué)參數(shù)均無明顯改變;
　　3.白藜蘆醇穩(wěn)態(tài)時在體內(nèi)曲線下面積AUC0-12h是496.68ug/L*h，平均AUC0-∞是521.79 ug/L*h、藥峰濃度Cma

11、x為351.22ug/L、半衰期T1/2是3.31小時、達峰時間Tmax為0.562小時、口服清除率CL/z為2281.37L/h;
　　4.服用14天白藜蘆醇前后氨氯地平藥動學(xué)參數(shù)無明顯差異;與未服用白藜蘆醇組相比，試驗組氯沙坦的8小時代謝比率增高。
　　研究結(jié)論
　　1.白藜蘆醇能抑制人體細胞色素酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6，對CYP2C19、CYP3A4的活性沒有顯著改變;
　　2.模型預(yù)測結(jié)