瘦素、STAT3及IL-6在哮喘大鼠氣道中的表達(dá)及孟魯司特的干預(yù)作用.pdf

1、 研究背景與目的：瘦素的主要生理作用是調(diào)節(jié)攝食活動(dòng)及能量平衡，但作為一種脂肪細(xì)胞因子樣蛋白多肽，近年來有研究表明其還具有促炎和免疫調(diào)節(jié)作用，瘦素主要與其受體結(jié)合通過JAK-STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。本研究旨在觀察瘦素(leptin)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)和白介素6(IL-6)在哮喘大鼠氣道上皮的表達(dá)和意義，以及孟魯司特對(duì)其表達(dá)的影響，探討可能存在的調(diào)控機(jī)制。方法：將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(A組

2、)、哮喘組(B組)、孟魯司特組(C組)、地塞米松組(D組)及孟魯司特地塞米松聯(lián)合用藥組(E組)。以卵清蛋白為過敏原致敏和激發(fā)大鼠，建立哮喘大鼠模型。正常對(duì)照組采用生理鹽水致敏和激發(fā)；孟魯司特組在激發(fā)哮喘前1天及1.5小時(shí)將孟魯司特溶于蒸餾水中15mg/kg灌胃；地塞米松組在激發(fā)哮喘前30分鐘給予地塞米松2mg/kg灌胃。于末次激發(fā)24 h后處死大鼠，取大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)行嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，蘇木精-伊紅(HE)染色觀察各組大

3、鼠肺組織的形態(tài)學(xué)改變；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)大鼠支氣管肺組織中Leptin、STAT3、IL-6蛋白的表達(dá)；統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0軟件，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x?s )表示，行正態(tài)檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，方差齊者多組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)，方差不齊者用Dunnett T檢驗(yàn)。結(jié)果：(1) BLAF細(xì)胞計(jì)數(shù)：哮喘組細(xì)胞總數(shù)( 56.16±3.31 )及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(6.35±0

4、.21)明顯高于正常對(duì)照組細(xì)胞總數(shù)(21.81±1.41)及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(1.76±0.35)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；孟魯司特組細(xì)胞總數(shù)(42.05±2.57)及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(5.08±0.56)均低于哮喘組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0.01 ) ，但高于地塞米松組細(xì)胞總數(shù)(36.43±3.01)及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(4.24±0.43)和聯(lián)合用藥組細(xì)胞總數(shù)(29.58±1.48)及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(3.57±0.44)，

5、差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；(2)HE染色：正常對(duì)照組大鼠氣道上皮完整無水腫，纖毛未見脫落，肺泡腔內(nèi)亦未顯示炎性滲出，黏膜下無炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，支氣管平滑肌無增厚。哮喘大鼠氣道上皮水腫、變性和脫落，杯狀細(xì)胞增生，粘液分泌增多，細(xì)小支氣管內(nèi)可見黏液栓，粘膜下可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，其中淋巴細(xì)胞最多，肺泡腔內(nèi)可見明顯炎性滲出。孟魯司特組、地塞米松組及聯(lián)合用藥組炎癥程度較哮喘組減輕；(3)免疫組化：leptin、STAT3及IL-6在大鼠氣

6、道上皮均呈陽性表達(dá)。Leptin在哮喘組大鼠氣道的陽性表達(dá)積分(9.33± 0.61)較正常對(duì)照組(5.6±0.49)明顯增高，孟魯司特組(7.85±0.59)高于地塞米松組(6.80±0.57)和聯(lián)合用藥組(6.16±0.53)，但均低于哮喘組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)；STAT3在哮喘組大鼠氣道的陽性表達(dá)積分(8.5±0.80)較正常對(duì)照組(4.50±0.47)明顯增高，孟魯司特組(6.82±0.68)高于地塞米松組(5

7、.51±0.58)和聯(lián)合用藥組(5.20±0.52)，但均低于哮喘組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；IL-6在哮喘組大鼠氣道陽性表達(dá)的積分( 12.66±0.66 )較正常對(duì)照組( 6.22±0.58 )明顯增高；孟魯司特組(11.66±0.59)高于地塞米松組(9.33±0.62)和聯(lián)合用藥組(9.11±0.57)，但均低于哮喘組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)。結(jié)論：(1)leptin、STAT3及IL-6在哮喘大鼠氣道