2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  觀察甲磺司特(Suplatast tosilate,IPD)干預(yù)治療前后哮喘大鼠氣道高反應(yīng)性(Airway hyper responsiveness,AHR)、氣道炎癥反應(yīng)、肺組織白細(xì)胞介素5(Interleukin-5,IL-5)和GATA結(jié)合蛋白3(GATA binding protein3,GATA-3)的基因表達(dá)變化,探討IPD對哮喘大鼠IL-5的作用機(jī)制及其在哮喘防治中可能的作用機(jī)理。
  方法:

2、>  1.取4周齡雄性成年Sprague-Dawly(SD)大鼠(體重200±20g)50只,隨機(jī)分為5組:對照(Control)組、模型(Model)組、布地奈德混懸液干預(yù)治療(Budesonide, BUD)組、IPD致敏階段干預(yù)治療即IPD早期干預(yù)治療組為IPD(A)組、IPD激發(fā)階段干預(yù)治療即IPD晚期干預(yù)治療組為IPD(B)組,每組各10只。
  2.除 Control組以外的其余四組大鼠分別于第1天和第8天腹腔注射10

3、﹪卵蛋白(Ovalbumin,OVA)混合液1ml(含OVA100mg,以氫氧化鋁100mg作為免疫佐劑)致敏。2周后再進(jìn)行激發(fā),給予2﹪OVA泵霧化吸入,10分鐘/次,每天1次,連用7天,建立哮喘大鼠模型,在致敏與激發(fā)階段 Control組均用生理鹽水替代。BUD組在每次激發(fā)前泵霧化吸入 BUD,IPD(A)組與 IPD(B)組分別從致敏階段和激發(fā)階段進(jìn)行IPD(50mg/kg.d)灌胃干預(yù)治療。
  3.各組大鼠在末次激發(fā)24

4、小時(shí)內(nèi)麻醉,經(jīng)氣管插管后行AHR檢測,檢測后立即腹主動(dòng)脈放血處死大鼠,取各組大鼠肺組織,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連鎖反應(yīng)法(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測肺組織IL-5與GATA-3mRNA的表達(dá),通過免疫印跡法(Western Blotting)檢測肺組織IL-5與GATA-3的蛋白表達(dá)水平,并進(jìn)行IL-5、GATA-3與AHR的相關(guān)分析,同時(shí)結(jié)合蘇木精-伊

5、紅(HE)染色肺組織切片形態(tài)學(xué)的觀察結(jié)果分析大鼠氣道炎癥反應(yīng)狀態(tài)。
  結(jié)果:
  1.哮喘大鼠模型的建立:Model組大鼠隨著激發(fā)次數(shù)的增加,開始出現(xiàn)煩躁不安、抓耳撓腮、活動(dòng)進(jìn)食減少、脫毛、腹部肌肉痙攣、呼吸急促、發(fā)紺、反應(yīng)遲鈍等哮喘樣表現(xiàn);激發(fā)7天后,進(jìn)行氣道反應(yīng)性測定,顯示Model組大鼠氣道反應(yīng)性增高,與Control組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);結(jié)合HE染色肺組織切片形態(tài)學(xué)檢查顯示:氣道周圍明顯炎癥改變,

6、氣道平滑肌增生、杯狀細(xì)胞增多、粘性分泌物明顯增加,提示哮喘大鼠模型構(gòu)建成功。
  2.大鼠AHR測定顯示:鹽酸組胺劑量依賴性地增加氣道阻力,組間比較差別明顯。在相同的鹽酸組胺激發(fā)濃度,BUD組、IPD(A)和IPD(B)處理可顯著減弱鹽酸組胺誘導(dǎo)的氣道阻力增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);IPD(A)組與BUD組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但I(xiàn)PD(B)組較BUD組抑制AHR的作用減弱(P<0.05)。
 

7、 3.病理組織學(xué)檢查:Model組氣道周圍炎癥改變明顯,氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤、杯狀細(xì)胞大量增多、氣道平滑肌增生、氣道粘性分泌物明顯增加,但I(xiàn)PD(A)組、IPD(B)組和BUD組氣道周圍炎癥改變不明顯,其氣道周圍炎癥細(xì)胞浸潤、氣道粘液分泌物、氣道平滑肌增生及杯狀細(xì)胞增多現(xiàn)象較Model組明顯改善。
  4.肺組織IL-5和GATA-3mRNA表達(dá)量:哮喘大鼠Model組IL-5、GATA-3 mRNA的表達(dá)量較Control組明顯

8、增高(P<0.05);BUD組、IPD(A)組和IPD(B)組IL-5、GATA-3mRNA表達(dá)量較Model組顯著降低(P<0.05);IPD(A)組與BUD組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IPD(B)組與BUD組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  5.肺組織IL-5和GATA-3蛋白表達(dá)量:哮喘大鼠Model組IL-5、GATA-3蛋白的表達(dá)量較Control組明顯增高(P<0.05);BUD組、IPD(A)組

9、和IPD(B)組IL-5、GATA-3蛋白表達(dá)量較Model組明顯降低(P<0.05);IPD(A)組與BUD組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),IPD(B)組與BUD組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  6.肺組織IL-5mRNA的表達(dá)量與氣道阻力成正相關(guān)(r=0.909,P<0.01);肺組織GATA-3mRNA的表達(dá)量與氣道阻力成正相關(guān)(r=0.867,P<0.01);肺組織IL-5蛋白的表達(dá)量與氣道阻力成正相關(guān)

10、(r=0.794,P<0.01);肺組織GATA-3蛋白的表達(dá)量與氣道阻力成正相關(guān)(r=0.775,P<0.01);肺組織IL-5mRNA的表達(dá)量與GATA-3mRNA的表達(dá)量成正相關(guān)(r=0.942,P<0.01);肺組織IL-5蛋白的表達(dá)量與GATA-3蛋白的表達(dá)量成正相關(guān)(r=0.806,P<0.01)。
  結(jié)論:
  1. IPD能抑制哮喘大鼠氣道炎癥及降低氣道高反應(yīng)性。
  2. IPD能抑制哮喘大鼠肺組織

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