NF-κB對(duì)成年大鼠神經(jīng)干細(xì)胞增殖和分化的影響及自噬在其中的作用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：本文在QA損傷大鼠紋狀體所導(dǎo)致的病理模型上，就NF-κB在大鼠腦內(nèi)NSCs的增殖和分化中所起到的作用進(jìn)行研究，并初步研究自噬在該過(guò)程中的作用。 方法：采用紋狀體注射QA(60 nmol)的方法建立腦損傷的病理模型，腦損傷后第六天在大鼠的損傷同側(cè)側(cè)腦室中注射NF-κB抑制劑SN50(10 nmol/ul)或者生理鹽水，并且每隔8小時(shí)在大鼠腹腔注射一次BrdU(50 mg/kg)，第七天進(jìn)行灌流固定。用4％多聚甲醛后固定6-9

2、小時(shí)后依次用20％和30％的蔗糖脫水過(guò)夜直至腦組織下沉至容器底部，然后在恒冷切片機(jī)上切片(20μm)，貼在明膠處理過(guò)的載玻片上。我們分別用尼氏染色和免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)模型的成敗及NSCs的增殖情況：用免疫熒光雙標(biāo)的方法檢測(cè)NF-κB(p65)及其抑制劑SN50對(duì)NSCs的增殖與分化的影響；通過(guò)檢測(cè)自噬蛋白(LC3)的表達(dá)情況來(lái)觀察自噬在其中的作用。并從同樣的動(dòng)物模型中提取其紋狀體組織，用Western blot法檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白的表

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