DNA聚合酶κ和DNA聚合酶η在烷化劑MNNG引起的非定標突變中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目前對哺乳類動物細胞中非定標致突變情況的研究尚不多.我們和其它實驗室已有的工作證明哺乳類細胞中也存在非定標突變.我們用攜帶靶基因supF tRNA的穿梭質(zhì)粒pZ189轉(zhuǎn)染在12-24小時前經(jīng)低劑量烷化劑N-甲基-N'-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)處理過的細胞并使之在其中復(fù)制.在回收的質(zhì)粒中,我們檢測到了延遲發(fā)生的、高于對照的突變.其中本實驗室已經(jīng)證實的發(fā)生非定標突變的聚合酶有Polβ、Polζ.該課題繼續(xù)研究了Polκ、Polη與非定

2、標突變的關(guān)系.1.建立Polκ和Polη表達阻斷的細胞系.我們用反義RNA技術(shù)建立了Polκ表達下調(diào)的轉(zhuǎn)基因細胞系.FL-Polκ<'->、FL-Polη<'->細胞中MNNG誘發(fā)的非定標性突變率下降.提示Polκ和Polη對細胞遺傳穩(wěn)定性的維持有重要作用.但在MNNG處理細胞后再轉(zhuǎn)入pZ189質(zhì)粒,在FL細胞MNNG誘發(fā)pZ189質(zhì)粒,supF tRNA基因上的非定標性突變的突變頻率為8.6×10<'-4>,在FL-M細胞為8.9×1

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